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生物化学 核苷酸代谢与核酸合成.ppt
(1)内含子剪接 外显子:基因中的编码顺序DNA或相应的mRNA产 物,具有表达能力。 内含子:基因中的非编码顺序,是在成熟mRNA中 不存在的顺序。 (3)tRNA前体的加工 除去5’端和3’端的附加序列; 在3’端加上-CCA; 碱基的修饰; 等等。 (3)真核生物mRNA前体的加工 5’端Cap结构的生成 3’端多聚A的附加 剪接 甲基化 等等。 选择性剪接 (二)RNA的复制 RNA指导下的RNA合成 RNA病毒 RNA复制酶 (三)无模板的RNA合成 多核苷酸磷酸化酶 大肠杆菌的DNA聚合酶有三种: 活性:表13-1 DNA聚合酶Ⅰ(DNA pol Ⅰ):校对 DNA聚合酶Ⅱ(DNA pol Ⅱ):修复 DNA聚合酶Ⅲ (DNA pol Ⅲ):复制 DNA聚合酶Ⅳ(DNA polⅣ) DNA聚合酶Ⅴ(DNA polⅤ) ② 参与复制的其他因子 解旋酶 拓扑异构酶 单链结合蛋白 引物酶 DNA连接酶 /programs/view/Ux1UrfnFtI8/ (2)原核细胞DNA复制的过程 DNA解链 起始 引物合成 延伸 DNA链延伸 切除引物、填补缺口、连接相临的DNA片段 切除和修复错配碱基 终止 起始 引物 DNA聚合酶不能发动新链的合成,只能催化已有链的延 长。DNA的合成需要引物,引物为RNA。引物的合成不需 要引物。 在DNA模板链的一定部位,由引物合成酶催化,按 5’3’的方向合成与DNA互补的引物。 DNA聚合酶Ⅲ在引物RNA的3’OH上逐个加上与模板链 互补的脱氧核苷酸。 延伸 冈崎片段 DNA的两条链是反向平行的。DNA聚合酶的聚合 方向是5’ 3’。因此存在矛盾。 半不连续复制√: 一条链按5’ 3’方向连续合成 前导链 另一条链的合成不连续,先按5’ 3’方向合成若干短的冈崎片段,再连接成一条完整的DNA链 后随链 3’ 复制叉移动的方向 5’ 5’ 3’ 前导链 5’ 后随链 3’ 3’ 5’ 引物的消除和缺口的填补 DNA聚合酶Ⅰ的5’3’外切酶活性将引物的核苷 酸逐个除去;每个核苷酸除去后立即被与模板链相 应位置碱基互补的脱氧核苷酸补上,这个反应由 DNA聚合酶Ⅰ的 5’3’聚合活性完成 。 DNA连接酶 各个冈崎片段通过DNA连接酶相互连接,最终形 成后随链。 终止 单向复制的环状DNA分子,其复制的终点就是原 点。 双向复制的DNA环形分子,在两个复制叉相遇时 即完成复制。 4 真核细胞DNA的复制 与原核细胞复制过程基本相似。 但参与复制的酶和蛋白质与原核生物不同,复制 起始的调控更复杂。 共同点 半保留复制; 半不连续复制; 需解旋酶解开双螺旋,并由SSB同单链区结合; 需拓扑异构酶消除解螺旋形成的扭曲张力; 需RNA引物; 新链合成均有校对机制。 主要差别 多起点复制,复制子小而多; 复制叉移动速度慢,但复制速度快; 冈崎片段为100-200nt; DNA聚合酶α、β、γ、δ、ε、θ、λ、μ等; 复制周期不可重叠; 复制时
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