轉基因植物蛋白浓度测定试剂盒测量标准.docxVIP

转基因植物蛋白浓度测定试剂盒测量标准一、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒简介概述：近年来，随着转基因技术的飞速发展，转基因作物及其产品大量涌现。但是由于转基因作物及其产品对人体健康和生物多样性的影响未经过长期检验，所以一直以来其安全性都受到社会各界的关注。为了保护消费者对转基因产品的知情权、选择权和健康权，各国都建立了多种方法对转基因植物及其产品中的转基因特征分子进行检测，以期对转基因植物从源头到餐桌进行全程监控。目前，由于各国对于转基因产品的标识有不同的要求，有些国家规定必须标明转基因成分的含量，并且各个国家对所标识转基因含量的要求不尽相同，为了解决贸易争端等问题，转基因产品的定性、定量检测成为关键。但是，由于缺乏国际普遍认同的标准，所以检测结果不可比的问题尤为突出。转基因检测标准的制定是解决转基因产品检测结果不可比的根本。转基因检测标准包括标准检测方法和标准物质。而转基因标准物质在转基因检测结果可比和可溯源方面起着重要作用。标准物质是具有高度均匀性、良好稳定性和量值准确性的一种测量标准。因此托普云农转基因植物蛋白浓度测定试剂盒的使用可以保证转基因产品检测缔果的有效和可比。二、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒原理；托普云农转基因植物蛋白浓度测定试剂盒用特异性抗 Cry1Ab/1Ac 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry1Ab/1Ac 单抗，双抗体夹心法检测 Cry1Ab/1Ac 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。三、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒试剂盒组份（规格）预包被板（抗 Cry1Ab/1Ac 单抗） 12 孔×8Cry1Ab/1Ac 酶标抗体 12 ml×1 瓶20×浓缩洗涤液 30 ml×1 瓶5×抽提液/稀释缓冲液 30 ml×1 瓶底物液 A 7 ml×1 瓶底物液 B 7 ml×1 瓶终止液 7 ml×1 瓶使用说明书 1 份0ppb 阴性对照 1ml4 个不同浓度的标样：0.5 ppb 1.0 ppb 2.0 ppb 4.0 ppb 各 1ml四、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒样品准备： 称取约 20 mg 叶片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室温）研磨至匀浆，室温放置 30 min，测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。 测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时，样品称取约 40 mg，加 1 ml 1×抽提液研磨。五、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒ELISA反应：1. 依次加 100 μl 阴性对照，标准品（4 个不同浓度的标样：0.5 ppb，1.0 ppb，2.0 ppb, 4.0 ppb）和待测样品至 96 孔板；2. 用封口膜盖住 96 孔板，快速摇动平板混匀样品；3. 37℃恒温箱孵育 30 min；4. 倒掉 96 孔板中液体，每孔加入 1×洗涤液 250 μl 洗涤微孔板，洗板 5 次，用吸水纸拍干；5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry1Ab/1Ac 酶标抗体，然后重复步骤 2；6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；7. 倒掉 96 孔板中液体，每孔加入 1×洗涤液 250 μl 洗涤微孔板，洗板 5 次，用吸水纸拍干；8. 依次加入 50 μl 底物 A 液，50 μl 底物 B 液，重复步骤 2；9. 室温（20-25℃）避光孵育 10 min，加 50 μl 终止液，充分混匀终止反应，15min 以内在酶标仪上读取结果。 在 450 nm 为主波长，630 nm 为次波长（或单波长 450 nm）下，用空白孔校零，再读取各孔 OD 值。六、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒注意事项：1. 托普云农转基因植物蛋白浓度测定试剂盒测定中需使用的所有试剂和 96 孔板提前 30 min 放置室温温育（否则会影响试验准确性），注意12 连管必须温育后再从平板上取下，未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存；2. 试剂使用前应充分摇匀；3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染；4. 使用洗涤液漂洗时，洗涤液需要填满每个小孔，进行充分漂洗；5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量，可以暂时在 4 ℃避光保存，但是最好在 24 h 内测定；6. 结果判读请在反应终止后 15 min 内完成。七、转基因植物蛋白浓度测定试剂盒Bt蛋白浓度计