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转基因试剂盒技术参数一、转基因作物概述转基因作物，是指利用分子生物学技术将某些生物的基因转移到其他物种中，使遗传物质得到改造的生物，兼具高产优质、多抗等诸多优点。由于目前尚缺乏科学依据证明转基因作物及产品的安全性，对人类健康和环境潜在的风险已引起广泛关注和忧虑。如何准确检测和识别转基因作物及其产品，也成为人们关注的热点。普云农基因植物蛋白浓度测定试剂盒是用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗，双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。二、转基因试剂盒产品编号规格：96孔检测样本：种子/叶片检测时间：约2小时有效期：12个月储存条件：2℃～8℃避光保存，切勿冷冻三、转基因试剂盒组份（规格）预包被板（抗 Cry2A 单抗） 12 孔×8Cry2A 酶标抗体 12 ml×1 瓶20×浓缩洗涤液 30 ml×1 瓶5×抽提液/稀释缓冲液 30 ml×1 瓶底物液 A 7 ml×1 瓶底物液 B 7 ml×1 瓶终止液 7 ml×1 瓶使用说明书 1 份0ppb 阴性对照 1ml3 个不同浓度的标样：1 ppb， 5 ppb，10 ppb 各 1ml四、转基因试剂盒样品准备称取约 20 mg 叶片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室温）研磨至匀浆，室温放置 30 min，测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时，样品称取约 40 mg，加 1ml 1×抽提液研磨。五、转基因试剂盒计算公式Bt 蛋白浓度（μg/g）=六、转基因试剂盒储存条件及有效期试剂盒储存于 2-8℃，切勿冻存；未开封试剂盒有效期 12 个月，开封后 3 个月内用完。（见包装盒上标签有效期）七、转基因试剂盒ELISA 反应1. 依次加 100 μl 阴性对照，标准品（3 个不同浓度的标样： 1 ppb， 5 ppb，10ppb）和待测样品至 96 孔板；2. 用封口膜盖住 96 孔板，快速摇动平板混匀样品；3. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；4. 倒掉 96 孔板中液体，用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板，漂洗 5 次，用吸水纸拍干；5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry2A-酶标抗体，然后重复步骤 2；6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；7. 倒掉 96 孔板中液体，用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板，漂洗 5 次，用吸水纸拍干；8. 依次加入 50 μl 底物 A 液，50 μl 底物 B 液，重复步骤 2；9. 37℃恒温箱孵育 10 min，加 50μl 终止液，充分混匀终止反应，15 min 以内在酶标仪上读取结果。在 450 nm 为主波长，630 nm 为次波长（或单波长 450 nm）下，用空白孔校零，再读取各孔 OD 值。八、转基因试剂盒注意事项1. 测定中需使用的所有试剂和 96 孔板提前 30 min 放置室温温育（否则会影响试验准确性），注意 12 连管必须温育后再从平板上取下，未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存；2. 试剂使用前应充分摇匀；3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染；4. 使用洗涤液漂洗时，洗涤液需要填满每个小孔，进行充分漂洗；5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量，可以暂时在 4 ℃避光保存，但是最好在 24 h 内测定；6. 结果判读请在反应终止后 15 min 内完成。九、转基因试剂盒技术参数本品适用于玉米、棉花、大豆以及其各种农作物中转基因成分的快速定性测试。十、转基因检测国家标准十、如何用转基因试剂盒检测食物的实验过程1、转基因试剂盒准备样品：将可疑的大米、稻种（去壳，约10-20粒）磨碎，尽量达到粉末状。如果是水稻叶片（约3-4片），需捣碎至泥浆状。2、转基因试剂盒配制蛋白质提取液：将检测用的粉末和纯净水以1：10的比例（体积比）混合，充分摇匀备用（约3分钟）。 容器可以选择10ml的塑料密封管。 配制完成后常温保存，当日配当日用。3、转基因试剂盒提取蛋白质：将磨碎的样本和提取液以1：4的比例（体积比）混合，充分摇匀（约1-2分钟），混合均匀后静置备用。容器可以选择1.5ml的塑料密封管。4、转基因试剂盒快速检测：保持垂