秋葵屬植物不同部分的精油的化学成分和抗氧化活性.docVIP

秋葵属植物不同部精油的化学成分和抗氧化活性 摘要 挥发油的提取；花和秋葵种子采用水蒸气蒸馏法提取。气相色谱（法）和质谱联用（GC - MS）对它们的化学成分进行分离和鉴定，得出挥发油组分含量和相对比例。用面积归一化法确定各组分含量。使用水溶性维他命E作为控制清除自由基活性（IC 50）。自由的选择测试不同部位挥发油。结果实验表明，有43种化合物在花中，20种化合物在叶中和29化合物在种子中。有11种化合物是常见的三部分的挥发油。结果显示本挥发油的不同部位都有抗氧化活性，和抗氧化能力的大小：花＞叶＞种子。清除有机自由基分别3.652升/毫升，5.170升/毫升，12.396升/ mL。实验为进一步研究秋葵挥发油成分以及探索和利用它提供参考。关键词：秋葵；挥发油；抗氧化活性物质 一、导言 秋葵是锦葵科abelmoschusmedic一年生植物。多用于食品和药物用途。秋葵起源非洲。现在被广泛种植于热带和亚热带地区。其嫩果实为食，有丰富的蛋白质，游离氨基酸和矿物质。其果实含有粘性材料制成的果胶，多糖等组分。它有营养与健康疗效，叶，花和种子促进胃蠕动和预防便秘。它味平和性寒，具有改善咽炎，淋巴清除，调节月经的功能。秋葵属叶，花和种子也可入药，它有治疗恶性疮痈和遏制艾滋病毒的功能。被认为无公害的“植物伟哥”。近年来，一些研究已获得的化学成分，药理影响，与临床应用[ 2]。但没有报道秋葵花和种子精油的化学成分[ 3]。本文采用水蒸气蒸馏法提取黄秋葵叶，花和种子中的挥发油，用气相色谱-质谱对化学成分含量进行了分离和鉴定，用面积归一化法测定各成分的含量。研究提取的不同部位挥发油的抗氧化活性，从而为开发和利用秋葵提供理论基础。 二、材料与方法 A.实验材料和设备 样品秋葵是林新春教授从浙江植物园农业和林业大学材料研究所采集标本存放于我们的实验室样品经洗涤和60℃烤箱干燥后储存在密闭容器备用。 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazly（1）和6 -羟基—2,5,7,8- tetramethychroman -2羧酸（中水溶性维他命E）（购买于西格玛公司）。所有均为分析级试剂。 安捷伦样本系统和安捷伦5975c惰性默沙东，气相色谱，质谱仪（美国安捷伦公司），hp-5ms（30米×0。25毫米，0.25米）石英毛细管柱，无限米200酶微孔板，READER（瑞士酶标仪），uv-2102电脑（上海仪表有限公司），挥发油提取装置，fe220轧机（北京z.x.mingye高科技有限公司），dgg-924a，烘干机（上海senxi实验室仪器有限公司），r201b旋转蒸发器（上海生生生物科技有限公司，）。 B.样品溶液的制备 采用水蒸气蒸馏法提取秋葵挥发油（中国药典2010版）[ 4]。 新鲜的秋葵叶、种子和花投入烘干到恒重，然后研磨至20目，得最后的样品准备提取，分别取花30克和种子100克，再分别把它们加入圆底烧瓶，用索氏提取器以乙醚为溶剂提取挥发油。提取完回收乙醚，收集挥发油为淡黄色透明油状液体有刺激性的气味。用无水硫酸钠脱水后存放于无菌小瓶。准备气相色谱-质谱（GC - MS）分析。 C . GC - MS条件 色谱条件：弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25um）色谱柱初始温度在50℃保持2分钟，以10℃/min升温速度升至135℃，再以5℃/min升温速度升至180℃；以10℃/min升温速度升至250℃；然后保持10 min柱流量0.8毫升/分钟，没有分裂样。 质谱条件：离子源质谱电子,电离模式：电子能量70eV。界面温度：230℃，离子温度：230℃，GC/MS接口温度：150℃，大扫描范围的29-400amu，溶剂延迟：20min。 化合物被确定使用nist2008质谱有哪些信誉好的足球投注网站程序。 确定清除活性自由基样品溶液的制备：将精油100g用无水乙醇于10毫升容量瓶中溶解，精密称30.5毫克，定容至100毫升容量瓶。精密称14.8毫克中水溶性维他命E用无水乙醇溶解。定容为100毫升。 确定清除活性的物质自由基：（1）试验1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl [5]广泛用于研究的抗氧化活性，其原理是根据自由基与抗氧化剂所提供的一个电子的结合，在517纳米不同的吸光度下颜色选择性消失的特征。根据它可以用来测定抗氧化剂的自由基的清除能力。96孔微量测定方法结合酶微板块reader（微板量化的方法）[ 9]。添加不同浓度100微升样本200微升DPPH溶液于微板块，再震荡30秒，在37℃30分钟，最后紫外吸收（）同时，确定吸收的样本没有加入自由基该自由基与100无水乙醇（）。自由基清除活动使用下面的公式：1 -（—AC）/×100%。使用样品浓度（×）为横坐标轴和清除自由基的活性（是）为垂直轴绘制校准曲线。计算I