有机分析实验讲义(本科生)年..docVIP

有机分析实验讲义 (2012年) 东北农业大学理学院应用化学系 第一部分 计算机模拟实验 实验一 计算机模拟实验-----红外吸收光谱、色质联用仪 一、实验目的 1.了解仪器的性能、用途、特点。 2.了解常用仪器的原理、操作过程。 3.仪器原理与结构介绍：仪器主要部件，仪器结构原理等； 4.红外、质谱等谱图的解析：谱图解析与化合物结构确定； 现代仪器分析----红外吸收光谱分析软件 使用说明： 红外吸收光谱分析软件运行后，在主界面中可首先点击图表选择按钮，可选听实验原理、实验演示、仿真实验、测验等相关内容。仿真实验中有7个实验可供选择。 思考题： 1. 红外光谱法的特点。 2. 红外光谱产生的条件。 3. 影响谱带位置的因素。 4. 红外分光光度仪结构。 现代仪器分析----气相色谱-质谱联用仪 使用说明： 气相色谱-质谱联用仪软件运行后，在主界面中可首先点击图表选择按钮，可选听实验原理、实验演示、仿真实验、测验等相关内容。仿真实验中有3个实验可供选择。 思考题： 1. 气相色谱-质谱联用仪组成。 2.色谱柱为什么会分离不同物质。 3.色谱检测器种类。 4.质谱仪组成。 实验二 凯氏定氮法测定食品中蛋白质 一、目的要求 1．学习有机样品中氮元素含量的测定原理及方法. 2．学习蛋白质含量测定的凯氏定氮法。 二、实验原理 蛋白质是一类复杂的含氮化合物，每种蛋白质都有其恒定的含氮量(约在14％～18％，平均约含氮16％)所以，可用蛋白氮的量乘以6.25(10016＝6.25)，算出蛋白质的含量。若以总氮含量乘以6.25，就是样品的粗蛋白含量。 通常测定总氮或蛋白氮，将材料与浓硫酸共热，硫酸分解为二氧化硫、水和原子态氧，并将有机物氧化分解成二氧化碳和水；而其中的氮转变成氨，并进一步生成硫酸铵。为了加速有机物质的分解，在消化时通常加入多种催化剂，如硫酸铜、硫酸钾和硒粉等。消化完成后，加入过量NaOH，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3导入过量的硼酸溶液中，再用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算，可得出含氮量。 试样中若含有硝态氮时，首先要使硝态氮还原为铵态氮，可加入水杨酸和硫代硫酸钠，使硝态氮与水杨酸在室温下作用生成硝基水杨酸，再用硫代硫酸钠粉使硝基水杨酸转化为铵盐。由于水杨酸与硫代硫酸钠会消耗一部分硫酸，所以消化时的硫酸用量要酌情增加。 三、仪器与试剂 仪器：消化管、微量凯氏定氮蒸馏装置、锥形瓶、滴定管、量筒、容量瓶、烧杯、 移液管等。 药品：硫酸铜(CuSO4)、硫酸钾(K2SO4)、硫酸(H2SO4)、硼酸、氢氧化钠、盐酸、0.1%甲基红乙醇溶液、5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液、碳酸钠(标定盐酸用) 材料：各种干燥、过筛(60～80目)的植物样品。 四、实验内容 1、化学试剂的制备 (1)配制 30% - 40%的氢氧化钠溶液，3-5升加入碱液桶中。(建议：用35%浓度，溶液在室温变化后不易结晶而堵塞管路)； (2)?配制甲基红-溴甲酚绿混和指示剂： 1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合，也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合； (3) 配制2%硼酸(H3BO3)溶液； (4)?配制盐酸滴定液：浓度根据被测样品的含量而定(一般为0.1-0.05 mol·L-l)，浓度需精确标定。 2、样品处理： 准确称取0.1-0.2g蛋白质样品或其他适量样品，移入干燥的消化管中，加入0.2g硫酸铜，3g硫酸钾及10mL硫酸，稍摇匀后于瓶口放一长颈小漏斗(或消化帽)，将消化管放入消化炉中小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。取下放冷，小心加20mL水，混匀备用。空白为取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾按同一方法进行处理所得样品。 3、定容：消化完毕的待测溶液冷却后，沿管壁仔细加入10mL左右无氨蒸馏水，以冲洗管壁，再将消化液小心转入100mL容量瓶中。以无氨水少量多次冲洗消化管，洗涤液并入容量瓶。冷却后用无氨水定容至刻度，混匀备用。 4、蒸馏：? 打开仪器电源开关，气泵开始工作，待两液桶鼓胀后，蒸馏器开始自动加水，此时不要按任何按键；约一分钟左右水位达到设定位置，也可打开设备后盖观察水位器中的水位是否达到两只短探针高度，然后才能进行下一步操作(此情况适用于开机时，如设备连续在工作则无此情况)。 向接收瓶内加入10mL 2% 硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下；