医院感染岗前检验篇__培训课件.pptVIP

采 样 及 操 作 方 法 1、涂布法 用无菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相应中和剂中 充分振荡或在混匀器上混匀30s 取200ul接种于培养基平皿表面 均匀涂布 每份样品同时做2个平行样 一个平皿置于20℃培养7d 观察真菌的生长 另一平皿置于35℃恒温培养箱培养72h 计数菌落数 怀疑与医院感染暴发相关时 进行目标微生物检测 消毒剂染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数×50 结果计算 2、倾注法 用无菌吸管吸取消毒液1ml 加入9ml相应中和剂中 充分振荡或在混匀器上混匀30s 分别取500ul接种于2个灭菌平皿内 加入已溶化的45℃～48℃普通营养琼脂15～18ml 边倾注边摇匀 待琼脂凝固 一个平皿置于20℃培养7d 观察真菌的生长 另一平皿置于36±1℃恒温培养箱培养72h 计数菌落数 怀疑与医院感染暴发相关时 进行目标微生物检测 消毒剂染菌量（cfu/ml）= 每个平皿上的菌落数×20 结果计算 中和剂 在微生物杀灭实验中 用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中 和微生物表面上残留的消毒剂 使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂 中和剂选择原则 本身对菌无影响 生成物对菌无影响 确能去除杀菌因子 消毒剂 中和剂 含氯消毒剂 硫代硫酸钠（0.1%-1.0%） 碘类消毒剂 硫代硫酸钠（0.1%-1.1%） 戊二醛（2%） 甘氨酸（1%）或甲醛（1%） 醇类消毒剂 吐温80（0.5%-3.0%） 过氧乙酸（0.1%-0.5%） 硫代硫酸钠（0.1%-0.5%） 过氧乙酸（0.5%-1.0%） 硫代硫酸钠（0.5%-1.0%） 常用消毒剂的中和剂 合格标准 皮肤黏膜消毒剂染菌 ≤10cfu/ml 灭菌剂染菌量 0cfu/ml 消毒剂染菌量 ≤100cfu/ml 对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂 使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测 未检出细菌为合格 消毒剂有效浓度的监测 使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求 连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定 每日使用，每日监测； 每周使用，每次使用前监测； 医务人员手卫生效果的监测 遵循WS/T 313 中华人民共和国卫生部行业标准 《医务人员手卫生规范》 手术室 产房 母婴室 新生儿室 口腔科 器官移植病房 层流洁净病房 烧伤病房 血液透析室 导管室 ICU 感染性疾病科 等部门 医疗机构应每季度对 医务人员手进行消毒效果监测 当怀疑医院感染暴发 与医务人员手卫生相关时 应及时进行监测 并进行相关致病微生物的检测 1、采样时间 手卫生后 接触病人或诊疗操作之前 2、采样方法 棉拭子法 被检人员五指并拢 用蘸有含相应中和剂的棉拭子 在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2次 一只手的涂擦面积约30cm2 并随之转动采样棉拭子 剪去操作者手接触的部分 将棉拭子投入10ml含相应中和液的试管中 立即送检 3、检测方法 同物体表面消毒效果检验方法 4、结果计算 菌落数（cfu/cm2) 平皿菌落数×稀释倍数 采样面积（cm2） = 5、合格标准 ?、Ⅱ类区域：细菌菌落总数≤5cfu/cm2 Ⅲ类区域： 细菌菌落总数≤10cfu/cm2 Ⅳ类区域： 细菌菌落总数≤15cfu/cm2 卫生手消毒： 细菌菌落总数≤10cfu/cm2 外科手消毒： 细菌菌落总数≤5cfu/cm2 不得检出治病微生物 压力蒸汽灭菌效果的生物监测 监测时间：每周一次 指示菌株：嗜热脂肪芽胞杆菌 （ATCC7953或SSIK31株） 培养基： 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 该菌为需氧芽孢杆菌，革兰氏染色呈紫色 细菌芽胞孔雀绿着色 在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上表面呈粗糙呈米黄色 嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953或SSIK31株） 最适生长繁殖温度为56–65℃，培养24h形成菌落 热死亡时间为121℃ 嗜热脂肪芽孢杆菌菌片 染菌量为5×105–106cfu/片 检测方法 将嗜热脂肪芽胞杆菌菌片放入 灭菌的小纸袋内 置于标准实验包中心部位 标准生物监测包应置于灭菌器排气口的上方 或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位 试验包制作 3件平纹长袖手术衣 4块小手术巾 2块中手术巾 1块大手术巾 30块10cm×10cm纱布敷料 裹成25cm×30 cm×30cm大小 若指示菌片中的细菌未被杀灭 可分解培养基中的葡萄糖产酸 使指示剂溴甲酚紫 由原来的紫色变成黄色 对照管为黄色 灭菌合格仍为淡蓝色 灭菌不合格为黄色 自含式生物指示剂 使用方法 经过一个灭菌过程后 取出指示剂管 挤破内含的安瓿 与对照管一起放入 56℃培养48h