乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系.docVIP

乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系 　　[摘要] 目的 探讨乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系。 方法 采用免疫组化S-P法检测乳腺癌组织中Livin蛋白表达，并探讨其与患者年龄、组织学分级、临床分期和淋巴结转移等临床病理特征和细胞增殖的关系。另选择20例癌旁正常组织和10例正常乳腺组织作对照。 结果 Livin蛋白在正常乳腺、癌旁正常组织及乳腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势（χ2=18.28，P0.01）。乳腺癌组织中Livin蛋白表达与临床分期和淋巴结转移密切相关（χ2=4.19和7.73，P0.05或P0.01）。Livin表达阴性乳腺癌组织中PCNA增殖指数明显低于Livin表达阳性乳腺癌组织（t=2.37，P0.05）。 结论 Livin蛋白在乳腺癌发生和发展不同阶段的表达呈进行性上升趋势，Livin蛋白在乳腺癌细胞的增殖、侵袭、转移等活动中可起到促进作用，可作为预后评估的指标。 　　[关键词] 乳腺癌；免疫组化；Livin蛋白；临床病理特征；细胞增殖 　　[中图分类号] R735.34 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）04-0095-03 　　近年来研究发现乳腺癌的发生发展过程是一个多基因、多阶段的演进过程，与肿瘤细胞的过度增殖和凋亡密切相关[1]。Livin是一种新发现凋亡蛋白控制因子IPA 家族的新成员，能阻碍多种途径诱导的细胞凋亡，在大多数正常成人组织中不表达或表达较弱，而在一些肿瘤组织中高表达[2，3]。Livin的抗肿瘤细胞凋亡作用特性及在肿瘤发病过程中的作用越来越被临床重视，使其有望成为肿瘤诊断的新靶点[4]。本研究观察了在乳腺癌组织中Livin蛋白的表达在其与患者的临床病理特征和细胞增殖的关系。现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择2008年1月～2013年5月我院普外科手术切除女性乳腺癌患者55例。所有患者均具有完整临床资料且经术后病理证实，按TNM分期法分期：Ⅰ期18例、Ⅱ期22例和Ⅲ期15例，术前均未行放化疗；年龄37～82岁，平均（57.4±7.9）岁。另选择20例癌旁正常组织（距肿瘤边缘5cm）和10例正常乳腺组织作对照。 　　1.2 免疫组化染色 　　采用免疫组化S-P法。标本10%福尔马林液固定，石蜡包埋，连续4μm切片，采用高温修复抗原，正常血清封闭10min，倾去血清滴加Livin、PCNA-抗工作液4℃过夜，其余均参照说明书进行。采用DAB显色，苏木精衬染，脱水、透明、封片和镜检。以试剂公司提供的阳性切片作阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。Livin、PCNA蛋白单克隆抗体和免疫组化S-P试剂盒均由福州迈新生物公司提供。 　　1.3 观察指标 　　1.3.1 免疫组化结果判定 结果以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞。随机选取10个高倍视野，计数100个细胞，根据计数细胞染色强度计分，其中无着色为0分、浅黄色为1分、棕黄色为2分，棕褐色为3分；再根据染色阳性细胞百分比进行计分，其中（-）计为0分，阳性细胞的百分比≤10%计1分，阳性细胞的百分比11%～50%计2分，阳性细胞的百分比51%～75%计3分，阳性细胞的百分比75%计4分。我们定义计数细胞染色强度计分和阳性细胞比例计分的乘积≥2分即为Livin蛋白表达（+），否则Livin蛋白表达（-）[5]。 　　1.3.2 增殖指数（PI） 采用高清晰度彩色图文分析系统，选取10个高倍区域，计算1000个肿瘤细胞中PCNA阳性染色的细胞比例，即为增殖指数（PI）。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS17.0统计软件。计数资料采用相对数表示，用χ2检验。以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Livin蛋白在正常乳腺组织、癌旁正常组织及乳腺癌组织中的表达差异 　　正常乳腺、癌旁正常组织及乳腺癌组织中Livin的阳性表达率分别为0%（0/10）、35.0%（7/20）和67.27%（37/55），Livin蛋白在正常乳腺、癌旁正常组织及乳腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势（χ2=18.28，P0.01）。 　　2.2 乳腺癌组织中Livin蛋白与临床病理特征的关系 　　乳腺癌组织中Livin蛋白表达与临床分期和淋巴结转移等临床病理特征密切相关（χ2=4.19和7.73，P0.05）。见表1。 　　2.3 乳腺癌组织中Livin的表达与细胞增殖的关系 　　Livin表达阴性的乳腺癌组织中PCNA的增殖指数为（37.27±13.67）%；Livin表达阳性的乳腺癌组织中PCNA的增殖指数为（57.26±17.36）%。Livin表达阴性的