第十一章 霍乱弧菌_培训课件.pptVIP

微生物学检查 标本：呕吐物、米泔水样粪便 直接镜检 分离培养 PCR G-弧菌 碱性蛋白胨水 肠毒素 运动活泼 凝集反应 标本 病人粪便，肛拭 流行病学调查还包括水样 粪便标本：Cary-Blair保存液 肠道病原菌：甘油盐水缓冲保存液 直接镜检 革兰染色阴性 弧菌 悬滴法观察细菌呈“鱼群穿梭样”运动有助于诊断 分离培养 接种碱性蛋白胨水增菌 目前常用的选择培养基为TCBS（硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基 ），霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落 挑选可疑菌落进行生化反应 血清学反应----玻片凝集反应 形成菌膜 在PH8.8-9.0碱性蛋白胨水中生长表面形成菌膜 霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落特征（18-24h） 在选择培养基琼脂平板（TCBS）上生长，形成较大黄色菌落。 霍乱弧菌血清学反应（凝集反应） 防治原则 防： 霍乱死菌苗：肌肉注射，保护率50%，3-6个月 减毒重组活菌苗：口服，保护率82-100% 菌苗加类毒素：B亚单位+灭活菌细胞，3 年以上 霍乱、伤寒杂交菌苗：基因工程菌苗 致病性与免疫性 治：隔离，及时补充液体，敏感抗菌素 抗生素可选用四环素、 强力霉素、氟哌酸等。 * 霍乱弧菌(V.cholerae)为革兰染色阴性，弯曲呈弧状、逗点状，有单鞭毛，运动活泼。涂片呈“鱼群样排列”。 * 营养要求不高，耐碱怕酸，最适pH8.8-9.2，故初次分离霍乱弧菌常用碱性蛋白胨水增菌。 * 霍乱弧菌依靠活泼的鞭毛运动，游到小肠粘膜细胞的刷状缘，并借助菌毛粘附于微绒毛上，生长繁殖。 霍乱肠毒素由Ａ、Ｂ两个亚单位组成。Ａ亚单位为毒素的活性中心；Ｂ亚单位包围在Ａ亚单位周围，无毒性，能与小肠粘膜上皮细胞受体（神经节苷脂）结合，将霍乱肠毒素引入敏感细胞内，Ａ、Ｂ亚单位即解离。 Ａ亚单位进入细胞内，激活腺苷环化酶，使细胞内ATP大量转化为环磷酸腺苷（cAMP），以致cAMP浓度明显增加，引起小肠粘膜细胞功能改变，肠壁通透性大为增加，Na+吸收受到抑制，而Cl-、水份、粘液分泌增加，体液大量进入肠腔内，远远超过了肠腔的吸收能力，导致严重的腹泻。最多的一天可达二三十次，甚至无法计数。 由于胆汁分泌减少，致使吐泻物呈米泔样或洗肉水样，内含有大量弧菌。由于体液大量丧失，血液中和身体其他部位的水份也被迫外调，甚至连已经进入胃内的水份也不放过，于是出现喷射状的呕吐，切断了水份和食物的供用。 经过这样的上下夹攻，人体内水份所剩无几，造成严重脱水，电解质紊乱，加之ATP的生产亦受到抑制，导致肌肉痉挛和外周循环衰竭。若不及时治疗，可导致中毒性休克死亡。 * Ａ亚单位进入细胞内，激活腺苷环化酶，使细胞内ATP大量转化为环磷酸腺苷（cAMP），以致cAMP浓度明显增加，引起小肠粘膜细胞功能改变，肠壁通透性大为增加，Na+吸收受到抑制，而Cl-、水份、粘液分泌增加，体液大量进入肠腔内，远远超过了肠腔的吸收能力，导致严重的腹泻。最多的一天可达二三十次，甚至无法计数。 * 小肠粘膜上皮细胞受体（神经节苷脂） * 经过这样的上下夹攻，人体内水份所剩无几，造成严重脱水，电解质紊乱，加之ATP的生产亦受到抑制，导致肌肉痉挛和外周循环衰竭。若不及时治疗，可导致中毒性休克死亡。 “1893年的一天，在演奏完第六交响曲（悲恸交响曲）之后，柴可夫斯基来到大街上散步，忽然感到口渴，就进了一家饭店，要了一杯冷水喝，谁知就是这样一杯水要了他的命。是情杀、仇杀还是另有原因呢？凶手是谁呢？” 当时俄罗斯发生霍乱大流行，最后医生确认，这杯水中含有霍乱弧菌，致使天才音乐家柴可夫斯基染上致命的霍乱而死去。 为什么这个故事中特别指出是“冷水”？ 霍乱可能通过什么途径传播？ 冷水中有多少霍乱弧菌才可能使柴可夫斯基发病？ “千军万马过胃部”“集团作战”。 1883年，埃及发生了一次瘟疫大流行，成千上万的病人一批批死亡。患者往往起病急，出现严重的腹泻和呕吐，米泔样大便。若得不到及时救治，常常在短时间内因全身脱水、肌肉痉挛和周围循环衰竭，造成休克而死。 一名在印度某水电站工作的44岁工程师，突发大量水样泻，由于每小时约0.5L液体的丢失，患者很快出现紫绀及重度脱水症状，肠鸣音减弱，低血压，血容量减少，其排出物呈等渗，暗视野显微镜检查，发现逗点状微生物。 Q1、患者最有可能患有何种疾病？ Q2、如何确诊？ 病例分析 形态与染色：革兰染色阴性，弧菌，单端鞭毛，运动活泼。 扫描电镜 霍乱弧菌 一、生物学