分组标号设计.docxVIP

实验动物的标记与分组每每看到五花八门的分组，眼花缭乱的标号，我心底总觉得他们像在过家家似的游戏，只不过这游戏却又有着科研的神圣的光环。有的人在动物拿来后，匆匆地随手扔，扔到哪笼就哪笼。有的人标号很混乱，令人眩晕。有的人根本不知何为随机？但，标号与分组，确实是动物实验中最基本的常识。为何这么多人会不按章法一顿乱搞呢？无外乎是两个原因最为主要：一是缺少这方面的知识；二是一知半解，不够重视。因此，本期的专题想来谈谈这两个小问题。一般而言，标号是在分组之前。标号之后再随机分组。下面我们按照以下标题来逐个进行讨论。一、常用的标号方法及其优缺点二、常用的染色试剂及大、小鼠标号方法　三、分组的原则及设计简介　四、随机分组的方法五、每组动物数的确定第一、常用的标号方法及其优缺点实验动物在运来之后，要经历什么样的步骤呢？首先，要确认品系、雌雄、数量，并观察有无不良状态。这相当于一般商品交易中的“验货”环节。第二，要进行适应性喂养。在此期间只需按雌雄分笼，每笼饲养适当数目即可。这个时间至少三天，多则一周。在前面的专题中已有述及。第三，对动物进行标号。有多种方法，下面将一一具体介绍。第四，随机分组。注意，不是随机分组再标号，而是标号后再分组。因为没有标号是没法随机的。第五，进行实验处理。从这里开始，才是真正进入主题的实验了。包括造模、给药、手术等等处理。下面我们就先来讲讲编号的方法。标号是动物实验中非常重要的一项工作。因为一个实验中的动物品系一样、生物学特征基本无差异，不进行标号就没法识别。这样，实验也就无从进行。标号就是为了对实验动物“了如指掌”，便于记录和检测。标号方法应保证不对动物生理或实验反应产生影响，且号码清楚、易认、耐久和适用。标号一般借助于动物本身的一些特征来进行，如：被毛、脚趾、耳朵等；也可以辅助器具来进行，如：金属环或牌；也可以给单笼饲养的动物笼具编号以便识别。目前常用的标记编号方法有染色法、耳孔法、烙印法、挂牌法等。此外还有断趾法、剪尾法、被毛剪号法、笼子编号法等。A　染色法染色法是用化学物质在实验动物身体明显的部位，如被毛、四肢等处进行涂染，以染色部位、颜色不同来标记区分实验动物，是最常用、最易掌握的经济方法。据染液的不同，可染成黄色、红色、咖啡色、黑色等。此法适合于被毛白色的动物，如：大鼠、小鼠。但像C57小鼠为黑色或褐色，则不宜用。B．耳孔法耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号，根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少，来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵打孔后，必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部，以免伤口愈合过程中将耳孔闭合。耳孔法可标记三位数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在实验动物的耳郭上剪缺口的方法，作为区分实验动物的标记。如：兔。C．烙印法烙印法是直接把标记编号烙印在实验动物身体上，尤如盖印章一样。烙印方法有两种，对狗等大动物，可将标记号码烙印在其皮肤上（如耳、面、鼻、四肢等部位），对家兔、豚鼠等动物，可用数字号码钳在其耳朵上刺上号码；烙印完成后，伤口涂抹酒精黑墨等颜料，即可清楚读出号码。烙印法对实验动物会造成轻微损伤，操作时宜轻巧、敏捷，必要时麻醉，以减少痛苦。D．挂牌法挂牌法是将编好的号码烙印在金属牌上，挂在实验动物颈部、耳部、肢体或笼具上，用来区别实验动物的一种方法。金属牌应选用不生锈、刺激小的金属材料，制成轻巧、美观的小牌子。我们可根据实验动物品种、实验类型及实验方式，选择合适的标记编号方法。一般来说，大、小鼠多采用染色法，家兔宜使用耳孔法，狗、猴、猫较适合挂牌法，狗还可用烙印法。E　其它方法断趾法：剪去的一部分脚趾可渐渐长合，因此，不是太好分辨。剪尾法：有损伤。被毛剪号法：适合标号数字较小的，一般在５以内的数字。笼子编号法：适合于单笼饲养的动物。二、常用的染色剂及大、小鼠染色方法常用染色剂如下：（1）3% ~ 5%苦味酸溶液（即２，４，６－三硝基苯酚），因与动物的被毛中的蛋白发生反应，可染成较为牢固的亮黄色。可用水，也可用一定浓度的乙醇来配制。（2）0.5% 中性红或品红溶液,可染成红色。（3）2%硝酸银溶液，涂染后在可见光下暴露十分钟左右可染成咖啡色。（4）煤焦油乙醇溶液，可染成黑色。染色法适用于被毛白色的实验动物，如：大鼠、小鼠等。涂染方法：１单色涂染法单色涂染法是用单一颜色的染色剂涂染实验动物不同部位的方法。常用的就是苦味酸，或者品红。也有用苦味酸标雄性，品红标雌性的。均可。根据个人习惯及不同实验室的传统，可有多种不同的编号方法。当前的编号方法可谓林林总总，新的“发明创造”很多。甚至一个实验室不同的人做实验，编号方法完全不一样。但，在此，我想提醒大家一下：同一个实验室，标号方法最好统一。众所周知，药理实验一般都是要靠两个及以上的多人合作才能完成，非常需要协作精神。而如果参与实验的人对其中一个的编