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;;; 真 题 重 温;(3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011?新课标全国,39节选) ( ) (4)测定培养液中微生物数量,可选用显微镜直接计数法计数(2010?山东,34节选) ( ) (5)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供碳源。发酵过程中检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数(2014?山东,35节选) ( );2.(2013?新课标全国Ⅱ,39)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题: (1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用____________法或____________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。;解析 微生物纯化的方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。;(2)取该单菌落适当稀释,用________法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。;(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明_________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的__________________。;解析 对某种抗生素越敏感的致病菌,在该抗生素存在的范围内越不易生存,形成的透明圈就越大。故含A的滤纸片周围出现透明圈,说明有抗生素A的地方该致病菌受到抑制;B的周围没有透明圈,说明致病菌对抗生素B不敏感,通过含C的透明圈要比A的透明圈小,说明该致病菌对C的敏感性比A的弱;D出现了透明圈,说明该致病菌对D敏感,但是在透明圈上出现一个菌落,又排除杂菌污染,判断此菌落的微生物对抗生素D产生了耐药性。;(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素___。;3.(2013?四川,10节选)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。;(1)图甲中,过程①需要的酶有_______________________ _________。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以_____作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是___________________________________________。;(2)某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是__________________;推测该同学接种时可能的操作失误是___________。;(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种________菌的发酵罐需要先排气,其原因是______________________________________ ________________________________。;1.微生物的培养;(2)如图为倒平板操作过程,操作时要待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近进行。 制备固体培养基最后要将平板倒置,其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。 ;(3)平板划线操作;(4)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示:;2.某种微生物的分离与计数 (1)分离——选择培养基 ①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ③培养基中缺乏氮源时,可以分离得到固氮微生物。;(2)计数 ①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 a.筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。 b.计数方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性,则需设置重复组,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 ;②分解纤维素的微生物的分离 a.实验原理;(3)鉴定方法;1.下列有关实验室中微生物培养和分离的叙述,错误的是( ) A.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 B.高温灭菌的目的是杀死所有微生物 C.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落 D.稀释涂布平板法可用于计数活菌数目
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