TNFα对小鼠肾上腺皮质细胞生物学功能的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………………I 英文摘要……………………………………………………………………………IV 缩略词表……………………………………………………………………………Ⅷ 前言…………………………………………………………………………………1日Ⅱ舌…………………………………………………………………………………l 文献综述……………………………………………………………………………4 第一部分TNF．仅对小鼠。肾上腺皮质Y1细胞的增殖、凋亡及肾上腺皮质醇合成 的影响及其机理……………………………………………………………………16 材料与方法…………………………………………………………………………16 结果…………………………………………………………………………………23 材料与方法…………………………………………………………………………30 结果…………………………………………………………………………………35 第三部分TNFR介导的TNF．a影响Y1细胞凋亡及皮质醇合成的研究………38 材料与方法…………………………………………………………………………38 结果…………………………………………………………………………………45 讨{仑…………………………………………………………………………………51 结论与展望…………………………………………………………………………55 参考文献……………………………………………………………………………56 作者简介……………………………………………………………………………70 致谢…………………………………………………………………………………71 中文摘要 TNF．0【对小鼠肾上腺皮质细胞生物学功能 的影响 中文摘要 【背景与目的】 内毒素休克等重症感染性疾病的发病过程中，由于多种因素的作用，患者会 发生绝对或相对肾上腺功能不全，导致临床抢救成功率下降。TNF-Q是一种重要 的前炎症介质，是内毒素休克等重症疾病发生发展过程中主要的炎症介质，可作 用于下丘脑一垂体一肾上腺轴(HPA轴)的各个环节，影响肾上腺皮质的功能。 本课题组通过检i贝dTNF-Q对小鼠肾上腺皮质Y1细胞凋亡以及皮质醇合成的影响， 扰法下调Y1细胞中阳性表达的TNF受体，探讨TNF-Q对干扰后Y1细胞凋亡以及皮 质醇合成的影响；从而明确小鼠肾上腺皮质Y1细胞表面是否存在TNF-Q受体，存 在何种受体，以及TNF-Q对Y1细胞的作用是否通过该受体发挥作用；初步探讨 TNF-Ⅱ对Y1细胞凋亡和皮质醇合成影响及其作用机理。研究结果可为临床内毒素 休克等重症感染性疾病的救治提供一定的实验依据和理论基础。 【方法】 1、应用流式细胞仪检测TNF．0【在不同剂量、不同作用时间对Y1细胞凋亡的影响， 2、应用放免法检测一定浓度的TNF．0【或／和ACTH作用Y1细胞不同时间后对皮 质醇合成的影响； 皮质醇合成限速酶…类固醇激素合成急性调节蛋白(STAR)表达的影响； 受体类型； Blot法 检测干扰效果； 东南大学博士学位论文 量、时间上对凋亡通路的影响； 时间后对其皮质醇合成的影响。 【结果】 l、Y1细胞在100--250U／ml的TNF．0【作用不同时间后，细胞凋亡率明显增加 抑制Y1细胞由于ACTH介导的皮质醇合成的增加(尸0．05)； ， 共同作用Y1细胞StAR的表达受到抑制(P0．05)； ● ● ● ● 4、RT-PCR和免疫细胞化学结果显示：Y1细胞TNFRlmRNA和蛋白表达阳性， 。 TNFR2