第五章转录-分子生物学.ppt

不同生物的复制体系 功能 E.coli λ SV40/人 酵母 起始蛋白 DnaA O T抗原 ORC 解旋酶 DnaB DnaB T抗原 MCM 装配因子 DnaC P T抗原？ Cdc6 引发酶 DnaG DnaG Polα-引发酶 Polα-引发酶 聚合酶 PolⅢ的α亚基 Polδ Polδ,Polε 校正 PolⅢ的ε亚基 Polδ Polδ,Polε 滑动钳 PolⅢ的?亚基 PCNA PCNA 滑动钳装配器 ? 复合体 RF-C RF-C 单链结合蛋白 SSB RF-A RF-A RNA合成的基本特征： 5’→3’ 方向； 底物三磷酸核苷酸（NTP） 不对称转录，以单链DNA为模板。 不需要引物，合成是连续的。 对一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，且每个基因的转录都受到相对独立的控制。 大肠杆菌RNA聚合酶的组成 真核生物的RNA聚合酶 典型原核生物启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp 真核生物 RNA pol 启动子 ? 原核生物转录初始的tRNA和rRNA都不是最初的转录产物 因为： (1) 5’端都是单磷酸，而原始的转录产物5’三磷酸； (2) 分子比初始转录物小； (3) tRNA含有特殊的碱基，这些碱基只有通过一些化学修饰才可以得到。 真核mRNA的加工和成熟 第五章 转录 转录（transcription）：以DNA为模板合成RNA的过程。 转录所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶。 转录产生初级转录物为RNA前体（RNA precursor），必须经过加工过程变为成熟的RNA。 模板链, 无意义链：在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板。 编码链，有意义链: DNA双链中另一条不做为模板的链； 不对称转录：RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的。 第一节 转录酶 第二节 启动子 第三节 终止子 第四节 转录的机制 第五节 转录产物的后加工 第六节 RNA的剪接 第一节 转录酶 1 原核生物的RNA聚合酶 2 真核生物的RNA聚合酶 RNA合成的基本特征： 5’→3’ 方向； 底物三磷酸核苷酸（NTP） 不对称转录，以单链DNA为模板。 不需要引物，合成是连续的。 对一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，且每个基因的转录都受到相对独立的控制。 1 原核生物的RNA聚合酶（RNA polynerase） 1.1 RNA pol与DNA pol作用的相同点： DNA模板，Mg2＋，4种三磷酸核苷。 不同点： （1）RNA pol没有任何校对功能； （2）能起始新的RNA链。 1.2 组成 大肠杆菌RNA聚合酶由多亚基组成， α2ββ’ ωσ称为全酶, 480 KDa ?亚基与全酶结合疏松，很容易与全酶分离。 1.4 σ亚基/因子 σ因子在RNA聚合酶识别启动子的过程中起关键作用，σ因子可重复使用。 不同的?因子可识别不同的启动子 ?因子更替的现象 在细菌受到外界环境的急剧影响时，会改变所表达的基因，产生?因子更替的现象。 如环境温度升高时，大肠杆菌会开启rpoH基因的表达， 其产物?32能识别热激基因的启动子，而正常状态下表达的基因会