利用aflp分标记技术对部分菊花品种遗传多样性的研究.pdf

摘要 菊花(DendranthemaXgrandiflorum(KamaOKitam)起源于中国，是我国十大传 统名花和世界四大鲜切花之一。菊花品种繁多，种下变异极为丰富，具有重要的 经济价值。中国栽培菊花大约有3000个品种，具有悠久的栽培历史，株型、叶片、 花色，花瓣(小花)形态等都有非常丰富的变化。如此众多的品种和变异式样给品 种的分类、鉴定和品种权的保护带来极大困难。AFLP(扩增片断长度多态性)是一 种新的DNA分子标记技术，具有丰富的多态性、较好的稳定性和较高的个体特 异性，广泛应用于品种鉴定、遗传多样性分析、遗传图谱构建、基因定位等方面。 本试验在建立较稳定的菊花AFLP技术体系基础上，构建了26份菊花材料的图谱， 分析了其遗传多样性，以期为菊花品种鉴定、亲缘关系分析、高密度遗传图谱构 建、核心种质构建等奠定基础。 本文采用改良常规CTAB法提取菊花基因组DNA．其提取液成份 8．0)’20mmol／LEDTA，1．4mol／LNaCl，2％CTAB，2％ 为：100mmo／／LTris-HCL(pH PVP40，50 提一次，氯仿／异戊醇抽提一次，去除蛋白质，DNA降解少，无蛋白质和RNA， 获得了高质量的扩增模板。在此基础上，得到清晰的菊花AFLP图谱，从而建立 了最佳的菊花AFLP反应体系。 利用AFLP分子标记技术研究26个菊花品种的遗传多样性，从64对引物中 筛选出的7对AFLP选择性引物对菊花种质资源进行了AFLP分析，都得到了清 晰的图谱，表明这些引物用于菊花AFLP分析是可行的。7个引物组合共扩增出 389条带，其中多态性条带294条，多态性占75．54％，平均每个引物组合扩出多 态性条带42，0条，每一个引物组合都可将26个品种完全分开。说明菊花存在丰 富的遗传变异，遗传多样性水平很高。 另一方面使用NTSYS2。0软件，通过UPGMA法对所褥的多态性标记进行聚 类分析，获得聚类树状图，其相似系数为O．61--0．85之问，结果表明26份菊花种 质之间遗传关系相对来说比较近。依相似性系数O．75为界，将供试材料分成了五 大类群。所得的试验结果与菊花传统分类法大体上相一致，其结果表明：AFLP 技术是一种重复性高、多态性丰富、安全可靠的DNA指纹技术，可作为菊花分 类的依据和基础。因此，AFLP技术在菊花品种分类和遗传多样性分析上的应用 是可行的。 关键词：遗传多样性； AFLP分析；菊花品种； 聚类分析 fortheGenetic ofSome AFLPAnalysB DivenityChrysanthemumSpecies Abstract from Chrysanthemum(DendranthemaXgrandiflorum(RamaOKitam)originated in four Cllina．anditisoneofthetentraditionalfamousflowersChinaandthe famous flowersintheworld．Therearelotsofcultivarsandvariationsthis cutting among cultivated isestimatedthattherearemorethall eultivarsinCllin丑11壕 flower．It 3,000 and of cultivatsare butdi伍cult． identification protection chrysanthemumimportant length an附DNAmolecularmarker AFLP(amplifiedfrag