利用issr和apd对白桦纤维长度性状的标记研究.pdfVIP

耩蜚 摘要 本项研究通过测量和分析自榉天然种群中的583株个体的纤维长度，选择其中 条带与对盛褥维长度的鞫关犍，簿逸窭与鑫襻长纾绦憔状显蔫稳关戆SCAR标记。 主要结巢如下： l、通避怼白搀天然钟辩中583拣自桦个棼纤缨长度豹测量润统计分柝，镰暴表 踞这583株自榉的纤维长度呈正态分布，符合数量基因控制性状表型分布特点；为 媚大分辑辩不嗣令舔蠲墓飘缝扩蘧差菇，骧纾维长震兹篷热减t倍据毽差为袄懿， 途择其中t00株个体用予懿园组差异分析研究。 2、在传统CTAB法提取植物基因组DNA的旗础上，探索出…种更高效的 DNA提取方法一多次STE--CTAB法。瘸诧方法不仅缝有效去滁叁襻等本本檬澳中 的多糖、多酚和其它次譬兰代谢物质，丽盈得翻的基蕊疆DNA蕨爨完全满足PCR及 獒分子生物攀实验所要求瓣标准。 3、在系统分褥了影魄ISSR体系孵备静因豢錾戤上，建立了自榉基因缀ISSR 2 反应倭系及耩乎：ISSR--PCR，20pL体系：t0×bt濂br pL，M92十(25mmo城)2蕊， dNTPs(10mmol／L)0．4“L，引物(10retool／L)0．8HL，TaqDNA聚合酶1t』，模檄DNA 45 2pL。反应程序：94℃加热5rain，使模板DNA变性，然后进入下列循环：94 ng S，51℃运火30s，72℃廷{串30 ℃变性30 s，共诗30个缓琢，锤环结寒后，72℃延 伸7min； 4、遂过瓣100株自撵个体基毽组扩增条豢与其对应的纾维长壤的穗关分孝斥，樗 片段帮4袈RAPD片段。鞫{蟊系鼗必茨，说麓梵冀敬趣密瑷会壤蕊分李露令髂懿纾维 长度；反之，则会降低个体纤维长度。 5、将与自摊纤维长度密切相关的10条特异性片段中的7条(ISSR- 勘妤D-C27932，RAPD—C27925)转纯成SCAR标记。 6、程寨魏抟逝大学试验林场内隧梳深集100个黥撵枝条，选择其中20令纤维 长度大于和小于纤维长度均值加减1倍标准蓑的个体备10株用于SCAR标记验{芷。 成功率达到80％，从而为囱桦长纤维标记辅助育种奠定了基础。 荧键键盘栉；绎维性黢：ISSR；RAPD；So滚： Abstract traits l In血is measuredthefiber of583birchmaterialsandchose00 paper,we ISSRmarkersandRAPDmarkers．AfterwithISSRandRAPD individuls by surveying from andRAPD wereidentified 0 ISSR primers primers,1fragments havingsignificant correlationwiththe offibertraitsbasedoncorrelationcoefficientand length analysis into theresultsareasfollows： transformedSCARmarkers．and Successfully of 1、Fromthe result583 fibertraitswereshowedthe