离体筛选茄子抗脯氨酸突变体的初步研究.pdf

摘要 茄子(Solanum melongenaL．)是一种营养丰富、风味独特和具有奇特药用价值 的蔬菜，因而倍受欢迎。近年来，随着茄子消费的日益增加和茄子保护地栽培面积 的扩大，对茄子保护地专用品种的需求愈来愈强烈，但是目前保护地栽培的品种耐 冷、耐弱光的特性表现得还不是很突出。因而培育出能耐冷、耐弱光的保护地专用 品种显得菲常必要。 由于杂交品种的不断推广，导致许多地方品种的丢失，从而茄子的遗传背景逐 渐变窄。目前在茄子的栽培种中尚未寻找到耐冷性强的栽培材料，故很难通过常规 方法培育出耐冷的品种。采用体细胞融合、转基因技术等手段已经培育出了一些耐 冷的品种，无性系变异的利用也已经在一些作物上取得成功。这种变异在植物组织 培养后的再生植株中常表现得非常广泛，而且变异频率非常高。它可以发生在染色 体水平上，也可以发生在分子水平上。人们利用体细胞无性系变异结合压力筛选已 经培育出许多抗病、耐逆的品种。 结合本实验室条件，本项研究通过建立一套茄子离体培养技术，再进行体外选 择筛选到耐冷愈伤组织，并再生成植株。其主要结果如下： 1．茄子下胚轴和子叶在添加了NAA和BA生长调节剂的MS培养基上诱导，得到 了愈伤组织，但各种基因型之间的愈伤组织诱导率差异显著。BA与NAA的不同浓度 组合对茄子愈伤组织的诱导有着重要的影响，其中2．0 BA+0．2 ITl∥L m∥LNAA诱导 的愈伤组织较紧密，呈淡黄色至淡绿色，有利于分化。 2．不同基因型的茄子愈伤组织都可以分化出不定芽，但分化率不相同。尽管不 同基因型茄子愈伤组织分化出不定芽的最佳激素组合不相同，但2，0 m∥L~4．0m∥L 的BA对愈伤组织分化出不定芽起着重要的作用。另外，10 mg／L AgN03对促进不定 芽的分化也起着辅助作用。 3．不定芽在添加或不添加0．2 NAA的1／2MS培养基上都可以长根，2—3 mg／L 周后经细心移栽到花盆中，在28℃左右和高湿的条件下培养成活。 4．愈伤组织经过继代培养转接在添加不同浓度羟脯氨酸(L．Hyp)的继代培养 mmol／L时， 基上。随着L．Hyp浓度的增加，愈伤组织的存活率逐渐下降。当浓度为8 其存活率仅为4．3％；当进一步提高时，愈伤组织不能存活。因此以8 mmol／L的L．Hyp 为筛选压力，有望筛选到抗L．Hyp的突变体。 5．用8 mmol／L的L．Hyp进行反复筛选，获得了抗性愈伤组织，并再生成植株。 经耐冷性生理生化指标测定，抗性愈伤组织的脯氨酸含量与可溶性糖含量显著地高 于对照，而丙二醛含量和电导百分率却显著地低于对照，从而有更好的耐冷性。再生 植株的幼苗叶片脯氨酸含量显著地高于对照，而电导百分率却显著地低于对照，表 现出更强的耐冷性。 关键词：茄子：耐冷性；无性系变异；羟脯氨酸：突变体 Abstract akindof with Eggplant(SotanumL．)is abundant melongena popularvegetable flavoraswellas medical nutrition，special peculiar value．Inrecent