前列腺癌早期诊胶体金试纸的研制.pdf

摘 要 摘 要 背景：前列腺癌在我国男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率跃居第三位。目 前，对于前列腺癌的早期检测集中于前列腺特异性抗原(Prostateantigen， specific 方法费时、费力、不利于普及，而且费用昂贵。PSA的临界值在国际上惯用4ng／ml， 在中国，根据前期工作显示，PSA4～10ng／ml的前列腺穿刺阳性率仅为11．6％， 约有近90％的人经历不必要的前列腺穿刺、穿刺带来的并发症和对癌症的恐惧 感。 目的： 开发简单、快速的前列腺癌早期诊断方法具有十分重要的经济价值和社 会价值。本实验采用胶体金免疫层析法，建立快速检测PSA的方法。并且能够 半定量检测4ng／ml--10ng／ml这一PSA灰区范围，并结合年龄指导前列腺活检。 方法：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗PSA单克隆抗体1并均 匀涂布于玻璃纤维素膜上，两个不同浓度的PSA单克隆抗体2和羊抗鼠二抗分 别结合于硝酸纤维素膜上，依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸 组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中。 结果：测试结果表明PSA快速检测试纸条灵敏度为4ng／ml和10ng／ml，检测时 间为5min，批内和批间重复性为100％。试纸稳定性不因保存温度改变而受影响。 用临床60例血清标本检测，并与化学免疫荧光法测试结果进行比对，在灵敏度 为4n∥m1时，两种检测方法符合率为100％，在灵敏度为10ng／ml时，两种检测 方法符合率为95％，经X2检验分析两者没有统计学差异。 结论：本胶体金检测试纸优化了其传统的定性的检测效能，能对PSA进行半定 量检测，确定4ng／ml--10ng／ml这一灰区范围，检测时间短，操作简便、结果准 确可靠、稳定性、重复性好、成本低廉。其检测结果可结合患者年龄对前列腺 癌进行初步诊断，进一步指导前列腺活检。 关键词：前列腺癌，PSA，胶体金 Abstract Abstract canceristhethjrd diseaseinmaleofChinese． Background：Prostatemalignancy Prostate usedtoscreenfor cancer specificantigen(PSA)iswidely possibleprostate andCLIA areconventionalmethodsfordetectionof assays patients．Usually，ELISA PSAin is andthe costthat clinical，which time—consuming，complexoperationshi【gh limitedits PSAvalueof isconsidered widespreadapplication．Ingeneral，a 4ngJ7ml thecut—offfor cancer thelevelsofPSAabove1 suspectedpatients，and 0ng／mL risk indicate resultswith ofincidence．In are veryhigh China,there positive