农杆菌介导的马薯转基因体系的建立.pdf

农杆菌介导的马铃薯转基H体系的建讧 农杆菌介导的马铃薯转基因体系的建立 摘 要 马铃薯是世界最重要的粮食作物之一。在目前的马铃薯生产中，病虫害等问题很大 程度上限制了马铃薯产业的发展。同时，市场对马铃薯品质的要求越来越高，以及中国 加入世界贸易组织后马铃薯产业所面临的问题都给马铃薯的再种工作提出了新的课题。 由于马铃薯栽培种具有同源四倍体遗传分离的特点，所以用常规杂交育种很难在较短时 间内育成优良品种。利用转基因技术可以将单个有价值的基因转入现有的优良品种之 中，同时不改变现有品种本身所特有的优良性状。 农杆菌介导的转基因方法已被应用于许多马铃薯品种的基因转化之中。但由于马铃 薯的基因转化中存在基因型依赖性问题，所以有必要根据前人方法进行验证和改进。 本试验用E3、N2、N552、3#四个品种的茎段、叶柄、叶片为材料，建立了高效、 稳定的马铃薯基因转化的受体系统。发现以茎段为外植体较好，诱导愈伤组织的最佳激 素配方为lmgUl 再生。 试验进行了预培养时间、侵染时间、共培养时间三个因素对转化效率影响的研究， 确定了预培养2天、侵染5分钟、共培养2天的最佳转化途径。 通过使用上述受体系统和转化途径，以茎段为外植体的转基因外植体上芽分化率最 高可达到13．89％，但这一频率并不稳定；而以薯块为外植体的转基因外植体上芽分化 率最高可达到17．02％，且这一频率比较稳定。同时，由于以茎段为外植体的再生需要 通过诱导愈伤组织来实现，而以薯块为外植体可直接再生不定芽，转化步骤更简便，所 以以薯块为外植体的转化体系比以茎段为外植体的转化体系优势更强。 关键词： Solanumtuberosum L，Agrobacterium，基因转化系统 坐堡堕垫量塑呈丝蔓茎墨型竺墨塑些：兰 ——一一 Establishment of ofPotato Transgenic Mediated System by Agrobacterium tumefaciens Abstract Potatoisone ofthemost of theworld。Butserious crops diseaseshave important greatly the ofthe enhancementof consumer’s hampered demand developmem potatoindustry．The for andthe after WTOalso out goodquality potato comingchallenge bring emefing