人胰岛素A、B基因表达载体的构建与大豆遗传转化.pdf

摘要 植物医药生物反应器的设想是在上个世纪八十年代束提出的。由于它在理论 上是一个更为简便、廉价、安全、可靠的医用蛋白和多肽生产体系，因此，自二 十世纪九十年代以来它受到人们越来越多的关注。一大批医用蛋白和多肽在植物 中获得了表达，但是要应用于商业生产还任重道远。本研究通过分析大豆内源蛋 白和多肽密码子使嗣情况，筛选大豆偏爱密码子，人工合成了人胰岛素A、B链 基因，并经农杼菌介导转化常规大豆品种“吉30”，为最终人胰岛素基因在大豆 中的表达奠定了基础。主要研究结果如下： 工合成了人胰岛素A、B链基因。 2．将人胰岛素A、B链基因与含有超表达组成型启动子—C小Ⅳ35S启动子 (口BIl21．IN)工程菌。 杆菌EHAl05介导的大豆“吉30”子叶节遗传转化体系。 4，通过共培养和抗性筛选获得了能够在含卡那霉素的生根培养基上正常生 长的大豆抗性苗。 关键词：人胰岛素A、B链基因：大豆；人工合成；遗传转化 Abstract I’he ot reactorofmedicinewas intheendofl 980s． theoryplallt adVallced reactorhaVe more Nowadays．plantreceivedmorea11d attention v． itisa andsaferto medical or pmspectiVecheaper wayproduceproteinspolyp印tides， A numberofmedical or were great proteinspolypeptidesalreadyexpressed in t11ere isa beforcusbcfore reactorsareused efrectivelypiant．But longerway piant to commercialmedical or the produce proteinsp01ypeptides．Here，wesynthesized DNA ofAandBstrandofhujnaninsulin biasedcodona矗er sequence wi血soybean me codonbiasandin仃Dduceditintoconventionalstrain． aIlaIyzingsoybeall soybean transfo加1ation “Ji30”t}∞ughAgrobacterium-mediated the forthe ofhumaIlinsulinin resultsinthe way eXpression genesoybeall．Themajor areabstractedasfolIows： paper 1we theDNA ofAa11dBstr柚dofh岫aninsulinwith synt上1esized sequence biasedcodon啦er t11e codon