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农杆菌介导的油菜转hrpW基因的研究 摘要 随着油菜用途的扩展，其种植面积逐年扩大，而油菜存在油菜黑腐病 等多种危害严重的病害尚未得到根治，常规使用的化学农药防治方法则又 极易造成环境污染。Harpin是自然界中特定的细菌性植物病原菌产生的一 种由hrp基因编码的蛋白质。尽管Harpin本身不具有任何杀菌活性，但它 能诱导植物产生一种复杂的自然防御反应，抵御真菌、细菌和病毒病害。 因此，在油菜中导入十字花科植物黑腐病菌(Xcc)hrpW基因，使油菜自身 产生对病害的抗逆·性是一个良好的抗病途径。为此，本研究开展了以下试 验： 启动子和终止子，构建了pBI hrpW基因表达载体，将其导入农杆菌，分别 在非寄主辣椒苗和十字花科萝I、苗上进行压渗，鉴定hrpW的功能。 (2)以甘蓝型油菜为试验材料，以5-6d无菌苗的带柄子叶为外植体， 建立了高效稳定的带柄子叶再生体系：同时探索了影响根癌农杆菌介导转 化甘蓝型油菜子叶柄的各种因素。 (3)用农杆菌介导法将十字花科植物黑腐病菌hrpW基因导入甘蓝型 油菜中，共获得8株卡那霉素抗性再生植株，PCR检测证明6株植株中hrpW 基因已整合到油菜基因组中。 明确油菜可以通过生物技术手段获得改良的油菜品种，为提出新的抗 病策略提供了理论依据；也为进一步研究十字花科植物黑腐病菌的致病机 理提供了材料。 关键词：农杆菌十字花科植物黑腐病菌hrpW甘蓝型油菜转基因 I STUDIESONTRANSGENlC NAPUS RAPE(BRASSICAL．) WITHHRPWGENEMEDIATEDBY TUMEFACIENS ABSTRACT the of With use，the areasbecome extendingrape’S planting bigger after diseasescaused as year year．However,therape bybacteria,such Xanthomonas severe．The campes砌pv．campestris(Xcc)，arevery controlmethodsshouldresultintheenvironment generalchemistry isakindof the bacteroidal pollution．Ha印inproteinproducedby specific innatureencoded and can a phytopathogen byhrpgenes．Harpintrigger defense the complicatedphy’sical responseagainst virus itselfhasnobactericidal diseases，althoughharpin it bea should totransferthe ofXccintoBrassica goodway