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执业药师考试-分光光度法.ppt

紫外-可见吸收光谱 分子的价电子吸收了光的能量, 由低能量的基态跃迁到高能量的激 发态,在相应波长位置出现吸收带 形成的光谱,称为紫外-可见吸收光 谱 荧光为发射光。利用荧光的物理 特性进行定性与定量测定的方法称为 荧光分析法。 荧光法最主要的优点是测定灵敏 度高,选择性好。 荧光激发光谱(激发光谱) 横坐标 激发光波长 纵坐标 荧光强度 荧光发射光谱(荧光光谱) 横坐标 荧光发射光波长 纵坐标 荧光强度 定量测定原理 当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时,在较稀浓度范围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度成正比 二、荧光光度计 1、光源 汞灯或氙灯 2、单色器 滤光片或光栅(两个) [第二个位于激发光源垂直方向] 3、吸收池 低荧光玻璃或石英池 [四面透明] 4、检测器 光电倍增管 [在与激发光源垂直方向检测] 五、应用 1. 鉴别 2. 含量测定 对照品比较法 95:72、在测量药物荧光强度时,要在与 入射光成直角方向上进行测定,这是由于 A、荧光的波长比入射光的波长长 B、荧光强度比透射光强度小 C、荧光强度比透射光强度大 D、只在入射光成直角方向上才有荧光 E、荧光是向多方向发射的,为了减少 透射光影响 96:74、荧光是指当用一定波长的紫外光 或可见光照射某一物质时,此物质会在短 时间内发射出 A、波长较照射光波长为短的光 B、波长较照射光波长为长的光 C、波长与照射光波长相等的光 D、波长较磷光波长为长的光 E、波长与磷光波长相等的光 00:77、光电荧光计中采用的第二块 滤光片是为了 A、获得一定的激发光波长 B、获得一定的吸收光波长 C、获得较纯的荧光 D、滤去非平行光 E、滤去荧光 例、荧光分析法和紫外分光法的不同点 A、测定药物特性 B、原理 C、光源和检测器的位置 D、样品池 E、单色器 第三节 红外分光光度法 红外吸收光谱是由分子的振动及 转动能级的跃迁而引起的 将分子吸收红外光的情况用仪器 记录下来,就是红外光谱图 红外吸收光谱又称为分子的振-转光谱 红外分光光度法是利用物质分子吸收波数在4000~400cm-1范围的红外光而产生的吸收光谱进行分析的方法,由分子的振动、转动能级跃迁引起 一、基本原理 纵坐标 透光率(T%) 横坐标 波数或波长 二、红外分光光度计 1、光源 硅碳棒、Nernst灯 2、吸收池 KBr岩盐窗池(液、气) 片剂框(KBr压片) 3、单色器 光栅 4、检测器 真空热电偶 高莱池(Golay) 红外分光光度计的校正 以聚苯乙烯薄膜为测试样品,绘 制其红外光谱图,对仪器进行校正, 以确保测定波长的准确性和仪器的分辨率 * 分光光度法 第五章 第一节 紫外-可见分光光度法 根据物质对波长为200~760 nm波长范围的光吸收特性所建立的一种定性、定量和结构分析的方法。 一、基本原理 (一) Lambert -Beer定律 物质对单色光吸收特性与 浓度、液层厚度关系定律 摩尔吸收系数ε 百分吸收系数 C= 1mol/L l= 1cm C=1%(g/100ml) l= 1cm 二、紫外-可见分光光度计 1、光源 紫外区 氢灯或氘灯 可见区 钨灯或卤钨灯 2、单色器 棱镜或光栅 3、吸收池 石英或玻璃 4、检测器 光电池、光电管、光电

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