静电纺丝制备小直径血管支架及其血液相容性的研究.pdfVIP

助 能 材 料 静电纺丝制备小直径血管支架及其血液相容性的研究。 薛正翔1，陈登龙2，李 敏1 摘 要： 以甲酸为溶剂，将具有特定信号识别功能的 静电纺丝技术能够形成小直径的管状结构以及适当的 力学性能，这些特点赋予静电纺丝技术在组织工程血 RGD重组蛛丝蛋白(pNSR32)与聚己内酯(PCL)和壳 聚糖(CS)共混，采用静电纺丝技术制备复合纳米纤维管支架构建领域强大的优势。 小直径血管支架，扫描电子显微镜(SEM)观察支架材 根据蜘蛛丝的结构和功能特性，本室前期通过基 料的微观结构，并通过溶血率、动态凝血时间、血小板 因工程技术方法制备重组蛛丝蛋白，并在蛛丝蛋白的 黏附以及复钙化凝血时间实验评价支架材料的血液相 功能重复基因序列中引入RGD(精氨酸一甘氨酸一天冬 容性。研究表明，(1)所制备的pNSR32／PCL／CS复氨酸)三肽密码子，构建并表达了RGD-重组蛛丝蛋白 合纳米纤维支架内径为4mm，长度可达8cm，并且纤 维连续，孔隙相通，孔隙率达85％以上，支架具有三维 RGD三肽是粘附蛋白中能够为细胞表面特异受体蛋 多孔网状结构，有利于种子细胞在支架上的黏附、增殖 白识别的最小短肽序列，是目前应用最广、最有效的促 和迁移；(2)复合支架材料的溶血率5％，黏附的血小黏附肽。PCL具有良好的力学性能和柔韧性而CS则 板少且不变形，复钙化凝血时间达293s，与单独PCL有优良的生物相容性和可降解性。本文将pNSR32、 相比延长94s，说明该支架材料具有良好的血液相容 PCL和CS3种材料共混，应用静电纺丝技术制备 性，有望成为一种新型的小直径组织工程血管支架。 关键词：RGD-重组蛛丝蛋白；静电纺丝；小直径血管察支架材料的宏观形貌和微观结构，并对支架材料的 支架；血液相容性 血液相容性进行评价。 中图分类号：TB332；TQ322文献标识码：A 2材料与方法 文章编号：1001-9731(2009)i0—1716-04 2．1主要材料与试剂 1 引 言 人工合成血管和自体血管是目前临床上小直径 进口。CS，浙江玉环县海洋生物化学有限公司。新鲜抗 (6mm)血管移植物的主要来源。在实践中人工合成凝猪血。甲酸、乙醇、CaCI。、Nacl等均为国产分析纯。 血管存在植入后容易造成血栓形成、内膜增生、远期通 2．2主要仪器 畅率不高等问题；自体血管受到供体来源、直径及长度 静电纺丝仪，在本室自组装静电纺丝仪[5]的基础 等限制，还无法满足小直径血管移植物的供给需求。 组织工程血管为解决小直径血管移植物来源提供了有 公司。752型紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有 效的途径，制备可供细胞进行生命活动的支架并对支 限公司。 架材料进行生物学方面的评价是组织工程血管研究的 2．3实验方法 重要领域。近年，组织工程血管支架材料研究的重点 2．3．1纺丝液配制 是将不同材料按一定的方法组合构建为复合材料，如 以甲酸为溶剂，配制浓度(训／可)分别为2％ 明胶／弹力蛋白／聚丙交酯一乙交酯共聚物(PLGA)‘¨、 丝素蛋白／聚乳酸(PLA)[扪、胶原／聚己内酯(PCL)[33 等，以发挥材料各自的优点。 m(CS)质量比为5：85‘ 及m(pNSR32)：m(PCL)l 静电纺丝是一项独特的技术，利用聚合物溶液或 10的pNSR32／PCL／CS混合电纺溶液。 熔体在强电场作用下形成喷射流，射流凝固形成纳米 2．3．2电纺 纤维，以无纺布状排列在接收装置上。应用该技术制