维生素b与白质相互作用的研究.pdfVIP

II 万方数据 维生素B 和蛋白质相互作用的研究 摘要 维生素B 和蛋白质相互作用的研究 摘 要：蛋白质具有十分复杂的空间三维结构，且其结构分为四个层 次，分为一级、二级、三级、四级结构，具有生物活性的蛋白质分子往 往可以实现生物体的功能，在许多重要的生命和生理现象中都离不开蛋 白质的参与。进行蛋白质与药物等有机小分子之间的相互作用研究，建 立体外药物和蛋白质相结合的生理条件下的模型，探讨相互结合部位、 相互结合常数、相互作用力强弱等问题，对揭示药物结构与蛋白质之间 的相互作用，从分子水平上更深刻的认识蛋白质分子与小分子之间的相 互作用机理和作用规律有十分重要的作用；对于了解蛋白质结构与功能， 为生命科学的进一步研究提供了丰富的信息和数据；对于了解药物在体 内的分布和运输情况，药物的毒性及药物代谢动力学，药物结构与效果 及新药的设计，有非常重要的意义。本论文主要包括以下三个部分： 1. 利用荧光和紫外光谱两种理论和技术，研究了在模拟机体生理酸 度pH=7.9 的条件下胰蛋白酶（trypsin ）与维生素B （VB ）的相互作用 2 2 机理。结果表明，VB2 对trypsin 的內源荧光具有强烈的猝灭作用，在VB2 浓度较低时猝灭机制是静态猝灭，在 VB2 浓度较高时是动态和静态的联 合猝灭。并计算出了不同温度下的结合常数。确定了VB2 与trypsin 的结 合位置与色氨酸残基之间距离r 为 1.11nm ，能量转移效率E=0.79 。由热 力学参数ΔG0 ，说明二者的结合过程是自发进行的。ΔH0 、ΔS0 ，表 明了VB2 与trypsin 之间的作用力主要为氢键和范德华作用力。同样的方 法计算了VB 、VB 与trypsin 的相互作用，确定了他们之间的能量转移 1 9 距离 2.用光谱法研究了一定条件下VB1 与BHb 的相互作用。荧光光谱表 明，VB1 对BHb 的荧光有强烈的猝灭作用，热力学参数显示，VB1 与BHb 4 之间的作用力主要为静电引力。二者结合常数数值（数量级10 ）较大， 表明VB1 对BHb 有较强的结合力。根据Förster 非辐射能量转移理论，确 定了VB1 在BHb 中的结合位置与色氨酸残基之间距离r=0.47nm ，结合距 离小于 8nm，发生了非辐射能量转移。同样的方法计算了VB 、VB 与 2 9 I 万方数据 维生素B 和蛋白质相互作用的研究 摘要 BHb 的相互作用，确定了他们之间的能量转移距离。 3.采用荧光和紫外吸收光谱法研究了VB 、VB 、VB 与pepsin 的荧 1 2 9 光猝灭作用。结果表明，三种维生素均可以有规律地使 pepsin 的内源荧 光猝灭，并获得不同温度下维生素与pepsin 作用的热力学参数和结合常 数。利用同步荧光光谱法考察了三种维生素与