高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定.pdfVIP

A SILIAOGONGYE 坛 论 家 专 高抗菌活性乳酸菌的筛选及菌种鉴定 B 1 1 1 1 1 1 2 备 设 艺 工 ■李东霞 庞会利 王雁萍 谈重芳 倪奎奎 董湘熔 金庆生 （1.郑州大学离子束生物工程省重点实验室，河南郑州450052； 2.浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所，浙江杭州310021） 摘 要：研究旨在筛选适用于饲料青贮的高抗菌活性乳酸菌，并进行菌种鉴定。以藤黄微 C 球菌、沙门氏菌、大肠杆菌为指示菌，通过牛津杯双层平板法对从玉米、水稻、蔬菜残渣、猪粪、 究 研 验 试 鸡粪等样品中分离出的121株乳酸菌进行抑菌试验。通过生理生化，碳源发酵试验和16S rRNA分子鉴定及recA基因扩增对所选菌株进行鉴定。菌株ZZU 575具有较强抗菌活性，排除 酸、过氧化氢干扰后，其发酵上清液对大肠杆菌抑制作用消失，但对藤黄微球菌及沙门氏菌仍 有很强的抑制活性；其抑菌活性在酸性条件下较强，在加入蛋白酶K和胰蛋白酶以及100℃以 D 上热处理时明显下降甚至消失；ZZU 575被鉴定为植物乳杆菌。菌株ZZU 575在饲料青贮中具 康 健 道 肠 有潜在应用价值。 关键词：乳酸菌；抑菌活性；16SrRNA；recA doi:10.3969/j.issn.1001-991X.2013.19.005 中图分类号：S816.3 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2013）19-0013-05 E 乳酸菌是一种广泛分布于自然界而且普遍应 添加剂共12种，植物乳杆菌是其中的一种；菌体本素 元 量 微 机 有 用于食品、医药、饲料等领域的益生菌。乳酸菌可 身与所产植物乳杆菌素在饲料中主要应用于青贮 [6-7] 以产生多种抑菌物质，包括有机酸，过氧化氢及细 饲料、微生物发酵饲料及饲料添加剂等方面 。 菌素等；其中细菌素是由微生物通过核糖体合成 尽管乳酸菌在饲料青贮中已有所应用，但由于饲 F 机制产生的一类具有抗菌活性的蛋白类物质，抑 料种类繁多，分布区域环境条件差异较大，仍然需养 营 物 动 刍 反 菌范围不仅仅局限于同源的细菌，产生菌对其细 要广泛筛选优良乳酸菌，开发新的适合具体需求 菌素具有自身免疫性。细菌素与抗生素不同，一 的高效饲料青贮用乳酸菌添加剂。分离筛选高抗 些抗生素杀死病原微生物的同时，还会破坏动物 菌活性的乳酸菌，不仅有利于饲料青贮，还可以 肠道正常菌群，导致菌群失调、抵抗力下降，疾病 应用于食品、饲料的杀菌防腐和微生态制剂的研 G 物 动 济 经 的发病率增加等不良情况。而乳酸菌产生的细菌 究开发。本实验筛选出一株抑菌活性较强的乳 素因其具