高张盐水后处理对局灶性脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响和机制.pdfVIP

·猿园圆源 · 广东医学摇 圆园员园年员圆月第猿员卷第圆猿期摇 郧怎葬灶早凿燥灶早 酝藻凿蚤糟葬造 允燥怎则灶葬造摇 阅藻糟援 圆园员园，灾燥造援 猿员，晕燥援 圆猿 高张盐水后处理对局灶性脑缺血再灌注损伤后 神经元凋亡的影响和机制 何荣芝 ，黄焕森 ，常业恬员 员 圆 员 圆 广州医学院第二附属医院麻醉科（广州缘员园圆远园）；中南大学湘雅二院麻醉科（长沙源员园园员员） 摇 摇 【摘要】摇 目的摇 观察高张盐水对局灶性脑缺血再灌后神经元凋亡数量、神经细胞遭糟造原圆 和遭葬曾蛋白表达的 影响，探讨高张盐水脑保护的机制 方法摇 杂阅大鼠随机分为缘 组，每组员园 只 采用线栓法建立大鼠大脑中动脉 缺血模型，假手术组大鼠（孕组）栓线只插入颈内动脉缘 皂皂 缺血圆 澡后，静脉给予苑郾缘豫高张盐水（晕杂原粤 组）， 源郾圆豫高张盐水（晕杂原月组）或生理盐水（晕杂组）源 皂蕴辕 噪 ，缘 皂蚤灶 内给完，或不给任何药物（陨砸组） 给药后拔出线 栓到颈内动脉起始部，恢复大脑中动脉血流 再灌圆圆 澡后，深麻醉下大鼠开胸经主动脉灌注生理盐水和多聚甲 醛，酒精梯度脱水，石蜡包埋，行免疫组化检查，用栽哉晕耘蕴法测脑组织凋亡细胞数，免疫组化染色测遭糟造原圆、遭葬曾蛋 白表达 结果摇 孕组凋亡细胞计数很少，陨砸组和晕杂组凋亡细胞计数明显上升，与孕组相比差异有显著性；匀杂原粤 组和匀杂原月组凋亡细胞计数明显下降，与陨砸组相比差异有显著性 匀杂原粤组和匀杂原月组遭糟造原圆蛋白表达明显 多于陨砸组和晕杂组，遭糟造原圆辕 遭葬曾也高于陨砸和晕杂组，遭葬曾蛋白表达则相反 匀杂原粤组遭糟造原圆蛋白表达多于匀杂原月 组，遭葬曾蛋白表达则相反 结论摇 高张盐水能促进神经细胞遭糟造原圆蛋白表达，抑制遭葬曾表达，减轻局灶性脑缺血再 灌后神经元的凋亡 【关键词】摇 遭糟造原圆；遭葬曾；栽哉晕耘蕴；后处理 摇 摇 脑缺血后的细胞凋亡由数个基因参与控制，其中 后，深麻醉，打开胸腔，经心尖部插入灌注管，剪破右心 月细胞淋巴瘤原圆（遭糟造 原圆 ）家族是细胞凋亡最重要的 房，开始灌注冰生理盐水，接着灌注源豫多聚甲醛约 调控因子之一［员］。抗凋亡蛋白成员和促凋亡蛋白成员 圆园园 皂蕴，然后断头取脑，放入装有源益生理盐水的弯盘 之间协同作用共同决定细胞是否进入凋亡程序， 里，用剥离子分离左右大脑半球，放入源豫多聚甲醛固 遭糟造原圆和遭葬曾则是遭糟造 原圆 家族中重要的一对互相拮抗 定圆源 澡，然后常规酒精梯度脱水，自额叶至枕叶分为 的凋亡相关因子，这两类蛋白的比率决定了细胞是否 粤、月、悦、阅、耘缘等份，取悦脑片石蜡包埋，保存在源益冰 发生凋亡。高张盐水抑制多核中性粒细胞和巨噬细胞 箱，等候检测。 释放栽晕云原 ，理论上可以抑制细胞凋亡的外通道，减 α 员援圆援圆摇 栽哉晕耘蕴法原位检测细胞凋亡和凋亡细胞计数 ［圆］ 少细胞的凋亡 。圆园园怨 年 远 月至 圆园员园 年 猿 月利用 摇 阳性结果为棕黄色（核）或棕褐色，背景呈紫蓝色。 酝悦粤韵模型，观察高张盐水后处理对局灶性脑缺血再 凋亡细胞记数时，每张切片在镜下（圆园园伊 ）于缺血侧皮 灌注后神经元凋亡蛋白表达的影响，探讨高张盐水的 质随机采集缘个视野，采用 匀孕陨粤杂 原员园园园 图像分析系 脑保护作用及机制。 统摄入计算机，直接记数每个视野中的凋亡细胞个数， 员摇 材料与方法 取平均值作为凋亡细胞数。 员援员摇 材料摇 多聚甲醛购自云造怎噪葬公司，遭糟造 原圆 一抗购 员援圆援猿摇 遭糟造原圆和遭葬曾 的免疫组化分析摇 采用耘灶增蚤泽蚤燥灶 自杂葬灶贼葬 悦则怎扎 公司，货号泽糟原苑愿猿，员颐愿园稀释，遭葬曾一抗 二步法检测，阳性产物为棕黄色或棕褐色，背景为蓝 购自杂葬灶贼葬悦则怎扎公司，货号泽糟原缘圆远，员颐愿园稀释，二抗为 色