微生物实验第二次.pptVIP

Medical Microbiologyexperiment Ⅱ Hedan Department of Pathogenobiology Contents 口腔中细菌的检查 各种特殊培养现象示教 脓汁中葡萄球菌的分离鉴定（一） 产气荚膜梭菌→卵磷脂酶（α-毒素）→ 分解卵磷脂→ 甘油脂（不溶性） 磷酸胆碱（可溶性） 产气荚膜梭菌→牛乳培养基→发酵 乳糖→产酸、产气→酪蛋白凝固→ 部分酪蛋白胨化→石蜡凡士林混合 物上移→培养基呈零乱碎块状→为 “汹涌发酵” 观察白喉抗毒素 与白喉外毒素的双 向琼脂扩散现象， 判断其产毒性。 脓汁中葡萄球菌的分离鉴定（一） 分离鉴定程序 标本----直接涂片染色镜检：典型葡萄球菌，可做初步诊断 ----分离培养----可疑菌落----直接涂片染色镜检 （普通琼脂平板） 血浆凝固酶试验 药敏实验 脓汁直接涂片染色镜检 平板分区划线接种 * * 口腔中细菌的检查 革兰染色原理 G＋菌 G－菌 肽聚糖 多 少 脂质 少 多 空间构型 三维网格 二维平面 核糖核酸镁盐 多 少 PI 2-3 4-5 应用意义 1. 把细菌分为两类 2. 致病性不同 3. 治疗不同 G＋ 菌→ 青霉素、红霉素、头孢类 G－ 菌→ 链霉素、氯霉素、庆大霉素 步骤 制片→ 涂片→ 干燥→ 固定→ 结晶紫初染→ 碘液媒染→ 95％酒精脱色→ 沙黄复染→ 印干、观察 1. 结晶紫 1min 2. 碘液 1min 3. 95% 乙醇 30s 4. 沙黄复染 1min Clostridium botulinum （肉毒梭菌） Clostridium perfringens （产气荚膜梭菌） Clostridium tetani （破伤风梭菌） 卵磷脂酶试验 Stormy fermentation test （汹涌发酵试验） 汹涌发酵试验 C.diphtheriae （白喉棒状杆菌） Elek 平板毒力实验 AC：白喉抗毒素 S1： 产毒类白喉棒状杆菌 S2： 待检菌株 S3： 白喉棒状杆菌 swarming growth Proteus flagellum * * *