血栓心脉宁对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子表达的影响.pdfVIP

叠塑盟 M v。148N。4 JFujianM 2014August, u 237 t：,d Ifnlv … … ， 血栓心脉宁对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子表达的影响 杨小霞 ，李 国前 ，陈春雷。，王杰华 ，潘 莹 摘要 ： 目的 观察血栓心脉 宁对脑缺血再灌注损伤大 鼠脑组织 中血管内皮生长 因子 (VEGF)表达 的影响 。 方法 SD大 鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。线栓法制作大 鼠大脑 中动脉脑缺血再灌注模型，实验组于 造模前每 日灌 胃给药 1次 (800mg／kg)，连续 6d。于缺血 1h再灌注 24h后断头取脑 ，免疫组织化学法和半定量 PCR法检测缺血区脑组织 中VEGF的表达 。 结果 与模型组 比较 ，实验组大 鼠脑组织 中VEGF的表达水平 明 显增高，差别有统计学意义 (PO．05)。 结论 血栓心脉宁的脑保护作用机制可能与促进 VEGF的表达有关 。 关键词 ： 活血祛瘀剂 ；脑缺血 ；再灌注 ；再灌注损伤 ；血管 内皮生长 因子 ；方差分析 ；大 鼠，Sprague—Dawley 中图分类号： R-332；R285．5；R287；R322．81；R341；R743；R977．6 文献标志码 ： A 文章编号： 1672—4194(2014)04—0237—03 急性缺血性脑血管病是由于脑血流突然 中断而 实验组参考改 良Zea—Longa线栓法制备大 鼠大脑 中 导致脑组织缺血 、坏死的一种严重危害人类健康的 动脉栓塞模型_3]。血流 阻断 1h后拔 出线栓，形成 疾病 。预防和治疗缺血性脑血管病 已成为当前神经 再灌注 。假手术组大 鼠接受相似手术处理 ，但是不 病学研究的一个重要课题。血栓心脉宁是治疗脑缺 插入线栓 。再灌注24h后处死动物断头取脑 ，取右 血性疾病的中成药，能降低血黏度、改善血小板聚集 侧大脑半球视交叉后 6～11mm 的脑组织备用。 率、升高血流量 ¨1]。本研究在建立大 鼠脑缺血再灌 1．2．2 H—E染色 大 鼠脑组织制作 5 m 厚的石 注损伤模型，从促血管生长因子表达 的角度探讨血 蜡切片 ，经脱腊至水，先后加入苏木素 、伊红溶液进 栓心脉宁的脑保护作用机制 。 行染色 ，经脱水透 明，中性树胶封片，在 200倍光学 显微镜下观察脑组织 。 1 材料和方法 1．2．3 免疫组织化学法检测 VEGF蛋 白的表达 1．1 材料 大鼠脑组织切片经脱腊至水 ，按照试剂盒说明书操 1．1．1 动物 健康雄性 SD大 鼠24只，体质量 作 ，兔抗大 鼠VEGF一抗浓度 1：200，AEC室温显 250~300g(福建医科大学实验动物中心，动物合格 色，自来水冲洗 ，苏木素复染，水性封片剂封片。阴 证号 ：SCXK2012—0001)。随机分为 3组 ：假手术组 、 性对照用 PBS代替一抗。阳性细胞计数 ：每只大鼠 脑组织取 5张切片 ，每 张切片在 400倍光学显微镜 模型组和实验组 ，每组 8只。 下随机选取 5个视野，分别计数免疫反应阳性细胞 1．1．2 试剂 血栓心脉宁片(吉林华康药业股份有 限公司)，实验时以无菌生理盐水配制成所需浓度 ； 数 ，取平均值。 1．2．4 半定量 PCR法检测 VEGFmRNA 的表达 兔抗大 鼠血管 内皮生