免疫组织化学染色注意事项.docVIP

免疫组化染色的注意事项 BIN CHANG M.D Ph.D Shihezi University School of Medcine 如何应用免疫组化进行病理科研设计 ？ ? 科研课题的基本要求至少有四个 即 创新性、科学性、可行性和推广应用性。 关于创新性的重要性很好理解，谁喜欢东 施效颦、拾人牙慧、人云亦云的文章？谁 不 想 标 新 立 异 ， “ 国 内 外 尚 无 类 似 报 道 ” ？ 可对于病理科医生尤其是基层病理科医 生，采用免疫组化技术进行创新性的科 研，似乎免为其难。其实如果调整一下思 维角度，难者也就不难了。 ? 方法一，采用新抗体，最简单的办法。 如金属蛋白酶 MMP-9 抗体是一种新抗体，其抗原 MMP-9 与 肿瘤侵袭和转移有密切关系，但采用此抗体和免疫组化研 究肿瘤侵袭、转移的文章国外少见，国内尚无，读者不妨 一试。 ? 方法之二，旧抗体新用途。 比如关于凋亡及其相关因子表达与肿瘤发生发展的关系的 研究，国内外有大量报道，而关于其非肿瘤疾病的关系的 研究，却报道很少，有的甚至迄今未见报道。如果你将 P53 、 bcl-2 、 c-myc 、 Bax 、 ICE 等凋亡相关基因蛋白抗体用于非 肿瘤性疾病研究，一定会获得新发现。再比如， P- 糖蛋白 抗体绝大多数用于肿瘤耐药性研究，却极少用于非肿瘤性 疾病的研究。正常肝、肠道、肾等均表达 P- 糖蛋白，在非 肿瘤性疾病时这种表达有什么改变，这种改变又有什么意 义，迄今尚未了解，读者也不妨在这方面施展你的身手。 ? 方法之三 ，同时应用多种抗体进行普通免 疫染色或双重免疫染色研究二种或二种以 上抗原的协同表达，只要这几种抗体选用 合理，也比较容易获得新发现 。 ? High-grade endometrioid and serous carcinomas of the ovary and fallopian tube are responsible for the majority of cancer deaths and comprise a spectrum that includes early or localized (tubal intraepithelial carcinoma) and advanced (invasive or metastatic) disease. We subdivided a series of these tumors into three groups, (1) classic serous, (2) mixed serous and endometrioid and (3) endometrioid carcinomas and determined: (1) the frequencies of coexisting tubal intraepithelial carcinoma, (2) frequency of a dominant ovarian mass suggesting an ovarian origin and (3) immuno-localization of WT-1, p53, PTEN, PAX2 and p16. All tumors were analyzed for p53 mutations. ? Thirty six, 25 and 8 % of groups 1–3 were associated with tubal intraepithelial carcinoma ( P = 0.09) and 34, 45 and 62 % predominated in one ovary ( P = 0.028), respectively. Differences in frequencies of diffuse p53 immunostaining (85– 93 % ), WT-1 (70?98 % ) and p16ink4 positivity (69– 75 % ) were not significant for all groups. Greater than 95 % reduction in PAX2 and PTEN occurred in 67–75 and 5–12 % , respectively; however, PAX2 and PTEN staining intensity, when present, was often heterogeneous, highlighting different tumor populations. PAX2 and PTEN expression were markedly reduced or