熊果甙作为化妆品添加剂对酪氨酸酶抑制作用_宋康康.pdfVIP

第42 卷　第6 期 厦门大学学报(自然科学版) Vol.42　No.6 2003年11 月 Journal of Xiamen University (Natural Science) Nov.2003　 文章编号:0438-0479(2003)06-0791-04 熊果甙作为化妆品添加剂对酪 酸酶抑制作用 宋康康,邱　凌,黄　璜, 陈清西＊ (厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室, 福建 厦门361005) 摘要:熊果甙(Arbutin)作为化妆品添加剂具有增白效果, 主要是由于它对皮肤酪 酸酶有抑制作用.本文研究了熊 果甙对酪 酸酶的单酚酶和二酚酶活力的抑制效应.结果表明, 熊果甙对酪 酸酶活性的抑制作用表现为可逆抑制 效应.熊果甙对酪 酸酶的单酚酶的效应主要表现于迟滞时间有明显的延长, 但对稳态酶活力的影响不显著.160 mmol/L 熊果甙使得单酚酶的迟滞时间从82 s 延长到430 s, 增大4.24 倍, 稳态酶活力仅下降16%.熊果甙对二酚酶的 抑制作用显示浓度关系, 测定导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(I 50)为5.30 mmol/L, 其抑制作用为竞争性类型, 抑 制常数K 为2.98 mmol/L.本文通过研究熊果甙对酪 酸酶的抑制作用机理, 阐明了熊果甙作为化妆品添加剂的增 I 白作用机理. 酪 酸酶;熊果甙;抑制动力学;化妆品 关键词: 中图分类号:Q 356.1 文献标识码:A　　　　　　　　　　　　　　　 　　酪 酸酶(E .1.14.18.1)是一种含铜的多酚 酸酶, 其比活力为6 680 U/mg.熊果甙和二甲亚砜 [ 1～3] 氧化酶,是生物体合成黑色素等色素的关键酶 , (DMSO)均为Sigma 化学公司产品;L-3,4-二羟基苯 抑制其活力即可抑制黑色素的生成.目前已有一些 酸(L-DOPA), L-酪 酸(Tyr)为Aldrich 化学公司 酪 酸酶抑制剂作为化妆品添加剂投放市场, 有广 产品.其它试剂为国产分析纯,使用的蒸馏水为玻璃 阔的应用前景, 如曲酸、果酸、熊果甙、维生素 、动 重蒸水. 物胎盘提取液、芦荟提取液等,可以保护皮肤, 消除 1.2 　方 法 黑斑,具有增白效果.熊果甙化学名为4-羟基苯基- 酪 酸酶的酶活力测定同参考文献[5].在 β-D-吡喃葡糖苷, 是从植物中分离得到的天然活性 30 ℃恒温条件下测定波长为475 nm 的光密度值, 由 [4] 物质 , 日本资生堂于90 年代用熊果甙制成的膏霜 其随时间的增长直线的斜率计算出酶活力, (消光系 -1 及水剂化妆品添加剂已打入我国市场, 并占有较大 数 ε=3 700(mol/L·cm) .测定仪器UV-650 分光光 的市场份额.本文以熊果甙效应物,研究其对酪 酸 度计.熊果甙对酶的抑制作用的机理是通过 酶的抑制作用为,为阐明熊果甙作为化妆品添加剂 Lineweaver-Burk 双倒数作图, 比较酶催化反应的动 增白作用的分子机理提供了理论依据. 力学参数,包括表观米氏常数(K m )和最大反应速度 [6,7] (V )的变化来判断的 . 1 　材料与方法 m