IR3T3L1脂肪胰岛素抵抗细胞的建立.pdfVIP

J South Med Univ, 2015, 35(1): 103-108 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.01.20 ·103· 基础研究 IR-IR-33TT33-L-L11脂肪胰岛素抵抗细胞的建立脂肪胰岛素抵抗细胞的建立 1，2 1 3 1 1 2 ，4 聂绪强 ，杨建文 ，史海霞 ，张玉金 ，张建永 ，卞 卡 1 2 3 遵义医学院药学院，贵州 遵义 563000 ；上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心，上海 201203 ；上海交 4 通大学医学院附属第三人民医院中医科，上海 201999 ；美国乔治华盛顿大学生物化学与分子医学系，美国 华 盛顿 20052 摘要：目的 探讨3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞（insulin resistant 3T3-L1 adipocytes cell, IR-3T3-L1）最佳的建立条件。方法 采 -8 -7 用地塞米松（Dexamethason ，DEX）、1- 甲基-3-异丁基黄嘌呤（3-isobutyl-methylxanthine, IBMX）和不同浓度的胰岛素（10 、10 、 -6 - 1 - 1 10 mol ·L ）诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞，Oil red O 染色确定最佳胰岛素诱导浓度，继而用1 μmol ·L DEX 诱导建立IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（Glucose oxidase-peroxidase, GOD-POD）法对IR- 3T3-L1细胞的最佳诱导时间（24~ 120 h ）及其稳定时间（24~48 h ）进行了考察。结果 Oil red O 染色发现3T3-L1前脂肪细胞用 -6 -1 -1 DEX、IBMX 和10 mol·L 胰岛素诱导9 d ，90% 的前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞；用1 μmol·L DEX 培养96 h 后，脂肪细 胞葡萄糖消耗率达到最大（P=0.0003）；稳定时间考察发现，在36 h 内葡萄糖消耗与对照组比较有统计学意义（P0.001）。结论 - 1 - 1 -6 - 1 3T3-L1前脂肪细胞在1 μmol ·L DEX、0.5 mmol ·L IBMX 和10 mol ·L 最佳胰岛素浓度作用下诱导分化为成熟的脂肪细胞 后，用1 μmol·L-1 DEX 培养96 h 即可成功诱导成IR-3T3-L1-IR脂肪胰岛素抵抗细胞，