HPLC+法测定黄芩不同部位中黄芩苷和野黄芩苷的含量.pdfVIP

江’亘虫医药2013年11月第 l1期总44卷第371期 HPLC法测定黄芩不同部位中黄芩苷和野黄芩苷的含 旦 里 ★ 李晓芳 吴荣 叶喜德。舢 (1．江西省中医院 南昌330006；2．江西省余干县人民医院 余干 335100；3．江西中医学院 南昌330004；4．广州中医药大学 广州510006) 摘要 ：目的：建立HPLC法测定黄芩中不同部位的黄芩苷和野黄芩苷含量方法。方法：采用HPLC法，色谱柱为TexraC18柱 (4．6mm ×200ITlm，5wm)；黄芩苷检测：流动相为甲醇一水(54：46)，水用磷酸调pH值约为3(磷酸：水=2：500，v／V)，流速 为0．9mL／分，检测波长280am，柱温30~(2；野黄芩苷检测：以甲醇-0．2％醋酸溶液进行梯度洗脱，0—30分钟甲醇由40％增 加到70％；洗脱流速为0．9mL／分，检测波长334nm，柱温为30~C。结果：黄芩根、茎、叶中不同黄芩苷含量分别为 10．872％、 0．133％和0．075％，野黄芩苷为0．144％、2．257％和3．316％。结论：该法简单方便、稳定可靠，确定黄芩苷为黄芩根部位的主 要成分，野黄芩苷为其茎、叶的主要成分。 关键词 ：黄芩苷；野黄芩苷；HPLC法 中图分类号：R284．1 文献标识码：A 黄芩(ScutelalriabaicalensisGeorgi)来源于唇形 纯，水为 自制重蒸水。黄芩苷对照品，购于中国药品 科植物黄芩的干燥根，为多年生草本，主根粗壮，茎 生物制品检定所 (批号：110715—201016)；野黄芩 高约30—120cm，自基部多分枝。黄芩又被称为黄 苷对照品，购于北京亚希尔科技有限公司。黄芩根、 金茶、山茶根或者烂心草，是临床上十分常用的中 茎、叶均采购于市场。 药，具有 良好的泻火解毒、止血凉血、安胎除热的作 2 方法与结果 用。现代研究表明，黄芩富含黄酮类化学成分，其中 2．1 色谱条件 黄芩苷检测参考药典方法，并稍作 主要是黄芩苷 (baicalin)，黄芩甙药理作用广泛，临 改动：色谱柱为TexraC18柱 (4．6mm ×200mm，5 床主要用于抗菌、消炎和抗感染 ¨，等。而其茎叶 m)，流动相为 甲醇 一水 (53：47)，水用磷酸调 pH 为黄芩药材的地上部分，主要含有野黄芩苷(scutel一 值约为3(磷酸：水=2：500，v／V)，流速为0．9mL／ latin)，该成分具有清热解毒，扩张心脑血管，改善体 分，检测波长280am，柱温30~C，进样量20 。 内微循环等作用 。为了黄芩资源的合理利用和 野黄芩苷检测：色谱柱同黄芩苷检测，流动相以 生药 (或制剂)的质量控制，我们建立了黄芩苷和野 甲醇一0．2％醋酸溶液进行梯度洗脱，0—30分钟 甲 黄芩苷的HPLC分析方法，对黄芩不同部位的主要 醇由40％增加到70％；洗脱流速为0．9mL／分，检 成分黄芩苷和野黄芩苷的含量进行了测定。 测波长334nm，柱温为30~C，进样量 10 。 1 材料 2．2 对照品溶液制备 黄芩苷：精密称取在60o=【 HPLC仪器：Lc一20AT高效液相色谱仪 (岛津 干燥恒重的黄芩苷对照品6．00mg，加甲醇定容至 公司，日本)，包括SPD—M20A二极管阵列检测器， 100mL的容量瓶，配成60i,Lg／mL浓度的对照品溶 SIL一20A 自动进样器，LC—solution液相色谱工作 液，用时稀释至60、24、12、6、3Ixg／mL共 5个浓度梯 站。其它仪器：电子分析天平 FA2004，上海天平仪 度。 器厂；TDL一5一A型低速台式离心机，上海安亭科 野黄芩苷：精密称取在 P0 干燥器中干燥24 学仪器厂；QN一99粉碎机，韩国 日进精工有限公 小时的野黄芩苷对照品10．00mg，加 甲醇定容至25 司；8002型恒温水浴控制器，余姚明伟仪表厂。