CAMG薄层扫描法测定不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量.pdfVIP

JIANGXIJOURNALOF TRADITIO：~4LCHINESEMEDICINE CAMG薄层扫描法测定不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量 ★ 葛慷艳 张群智 (浙江省临海市中医院 临海317000) 摘要：目的：测定不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量。方法：采用薄层扫描法测定黄芪甲苷的含量。展开条件：氯仿一甲醇一水(26 ：12：4)的下层液，10％硫酸乙醇显色，单波长薄层扫描，A：536nm。结果：方法学考察结果表明，黄芪甲苷的线性范围为 0．8080～4．848 g(r=0．9991)；同板精密度实验的RSD为1．95％ ；3小时内稳定性试验 的RSD为0．79％ ；重复性试验 的 RSD为3．13％ ；加样回收率为99．92％，RSD为2．17％。结论：该方法测定结果准确稳定，重现性好；各产地黄芪中黄芪甲苷 含量间变异较大，其中甘肃产黄芪平均质量较优。 关键词 ：黄芪甲苷 ；TLC；CAMG 中图分类号：R927．2 文献标识码：A 黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalusmemerana— 丁醇饱和的水萃取2次(20、20m1)，正丁醇挥干，残 ceus(Fisch．)Bungevar．mongholicus(Bunge)H 渣用甲醇定容至 10ml，作为供试品 。 siao或膜荚黄芪 A．membranaeeus(Fisch．)Bunge 2．2 对照品的制备 精密称取黄芪 甲苷对照品 的干燥根，主要含有皂苷类、多糖、氨基酸和微量元 10．10mg，配成25ml，作为对照品溶液。 素等¨。黄芪皂苷是黄芪药效物质基础的重要组 2．3 色谱分析条件 展开条件：氯仿-甲醇一水(26： 成之一，其中黄芪甲苷(ASI)为活性指标成分，具有 12：4)的下层液。喷以10％硫酸乙醇，105qc显色5 抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等作 ～ 7分钟。反射法锯齿型单波长薄层扫描， =536 用。目前市售黄芪药材多为栽培，而野生较少，因此 nm，扫描速度，10nm／step，分辨率，25Ixm。 不同来源药材之间黄芪 甲苷含量有较显著的差异， 2．4 空白试验 取不含黄芪的阴性样品，按样品溶 从而影响药材的质量。曾使用高效液相色谱 一紫外 液制备供试品，测定，结果空白无干扰。 检测法测定黄芪甲苷含量，但由于其仅在200nm处 2．5 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液 2、4、 有弱的末端吸收，因而操作条件十分严格，噪音对结 6、8、10 l，分别点于同一个硅胶 G板上，展开，取 果影响较大，灵敏度也较差，而CAMG薄层扫描法 出，晾干 ，喷以10％硫酸乙醇溶液显色后进行测定， 不受紫外下无吸收成分的影响，且重现性好，是一种 以峰面积积分值 l，为纵坐标，以点样量 (g) 为横 良好的黄芪甲苷含量测定方法，本实验采用该法对 坐标作标准 曲线：Y=18511+9083X，r=0．9991。 不同产地黄芪中黄芪 甲苷含量进行测定，为黄芪药 说明黄芪甲苷在 0．8～4．8I．zg范围内线性关系 良 材质量控制提供实验依据 J。 好。 1 仪器、试剂与样品 2．6 稳定性实验 对 同一个对照品斑点，分别在 仪器 ：瑞士CAMAGTLCScanner，CAMAG半 自 0、30、60、90、120、150、180分钟扫描一次，连续 7 动点样仪。 次。样品稳定性RSD=0．79％：标准品稳定性：RSD 试剂与样品：硅胶 G薄层预制板 (青岛海洋化 = 0．87％。说明本品在 3小时内稳定 工厂)，黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所 2．7 精密度试验 ①同点精密度 (仪器精密度)对 0781—20008)；其余所用试剂均为分析纯。 同一斑点连续扫描5次，分别测定峰面积，RSD为 2 方法与结果 0．7