高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中曲马多与文拉法辛及其应用.pdfVIP

高效液相色谱一串联质谱法同时测定人血浆中曲马多和文拉法 辛及应用 张丽娟，余勤，梁茂植+，南峰，秦永平，向瑾 四川大学华西医院GCP中心临床药理研究室 曲马多(tramad01)为一种中枢性镇痛药，通过激动阿片受体和抑制单胺类神经递 质的再摄取产生镇痛作用。该药镇痛作用强，与同类阿片受体激动药物相比，不良反 应少而轻。文拉法辛(Venlafaxine)是5一羟色胺和去甲肾上腺素重摄取的强抑制剂， 与胆碱能、组胺能及肾上腺能受体无明显结合，无口干、低血压、镇静等不良反应， 已用于临床抑郁病人的治疗。国外已有报道将两者合用于抑郁和疼痛并发症的治疗n!。 和液质联用法。1，测定文拉法辛的方法有HPLC荧光法一3、HPLC—UV法怕1和液质联用法阳：。 作者尚未查见同时测定两药的报道。本文建立了高效液相色谱一串联质谱法同时测定 人血浆中曲马多和文拉法辛浓度的方法。 材料与方法 1仪器、药品与试剂 日本岛津公司SIL-HTC系列HPLC仪，配套系统控制器，高压梯度输液泵，全自动 AEl00 进样器；美国ABI公司API3000质谱仪，Analyst1．4色谱工作站；Mettler 分析天平，Eppedrof低温离心机，MILLIPORE公司Milli—Q纯水仪。 甲醇、甲酸、二氯甲烷均为HPLC级，其它试剂为分析纯。盐酸曲马多、盐酸文拉 法辛和内标维拉帕米化学对照品购自由中国药品生物制品检定所提供，批号分别为 171242—200302、100543—200401，10233—0102。 2试验条件 1 Gemini mMol·L 2．1色谱条件PhenomenexC18色谱柱，流动相：CH，OH：5 NH4AC柱 温：室温。 2．2质谱条件 电喷雾离子源(ESI)，温度450℃。采用多反应离子监测模式同时测 定曲马多(264．2／246．2m／z)、文拉法辛(278．4／215．3 m／z)，内标维拉帕米 (455．4／303．4m／z)。 3对照品和内标储备液配制 精密称l双盐酸曲马多对照品13．66mg(相当于曲马多12．00 mg)和盐酸文拉法辛 对照品】3．08mg(相当于文拉法辛12．00mg)，分别置于50ml容量瓶中，用50％甲醇 217 p u 溶解并定容至刻度，即得240g·mL‘曲马多贮备液和240g·mL。文拉法辛贮备液， 置4℃冰箱保存。临刷前用50％甲醇稀释至所需浓度的标准系列工作液。 精密称取盐酸维拉l帕米对照品5．4 mg(相当于维拉帕米5．00mg)，置25m1容量 u 瓶中，用I类纯水溶解并定容至刻度，即得200 g·mL’内标贮备液，置4C冰箱保存。 II 临用前用I类纯水稀释至所需浓度的0．4g·mL。1内标工作液。 4血浆样品处理 取血浆0．1mL，加入0．1mL内标工作液，漩涡混匀，加入0．2mL1Na0H液，漩涡混 匀后加入3mLCH：C1。萃取液，漩涡萃取8min，离心10min，抽弃上层液，转移下层 有机相于另一尖底试管，置40℃水浴中通空气流挥干，分装入全自动进样器，进样 20UL。 5标准曲线和线性范围 取空白血浆0．imL共9份，分另Ⅱ加入0．imL曲马多、文拉法辛的标准系列工作液