烤烟根病生防真菌的分离和筛选.pdfVIP

烤烟根病生防真菌的分离与筛选‘ 王家和 (云南农韭大学挂物囊理秉、云南省檀韵病理1点宴t室．臣嘲650201) 量要木文瓤遗1994～1996牛从云南省f宁I，宜蠢量，江川．it-．，干善，师宗I-夏昆啊市午地一田 采集捌土壤样品60静，筮分离砘化．获128个土壤囊生-■糠{通过拈抗活性潮定，其中有34个■掉 具有对蛔革黑腔病，井倒病，立拈病，枉黑庸^午4竹主要枉^病康蕾有抽抗作用．这34个蕾辕点拜 每个^的代表■辣进行坶烟种于置芽剥定，其中有TR一5，TR一6，GL--8．PE--9牛1个■棒抑■鼓 秉在50％以上．对上述4个蕾辣进行童栽试鼍}TR一6的防^鼓秉达83．3％I其他TR--5。GL～8及 PE一9_的防病效果也鼻选50％以上l鼻有一定的开置利用价值． 关■调烤■根痛 生防真- 筛选 烤烟根病是烤烟上一类重要的土传病害。引起根病的病原菌种类多，生态复杂，大多数为兼 性寄生菌，寄主范围广，土壤中存活形式多样。病害受土壤环境和栽培措施影响较大，防治一般 比较困难，单靠农药防治难以奏效，而且，土壤经常蘸用农药带来严重环境污染问题及烤烟品质 下降问题f在根病防治上要求探索新的防治技术。采用生物防治原理和技术，有利于持续农业的 发展，改善烤烟品质，提高根病综合防治水平。但是．烤烟根病生防真菌的分离筛选和利用，尚 末见报道。本研究针对云南省侮烟主要根病t黑胫病，根黑腐病，猝倒病和立枯病等的防治，分 离筛选有应用价值的生防真菌，为开发防治烟草根病的生物制荆提供依据。 1 材料与方法 1．1供试囊原 vat． paras出ica 按常规方法，从烤烟病根上分离纯化的斜面培养菌株lPH8(Phytophthora TH一2 nicotianae)I solani)I PY一12(Pythium aphanidermall‘n)·RH一3(Rhizoctonia basicola)作为供试病原物。 (Thielaviopsis 1．2拮抗荫生■的分■与纯化 cnl的土样为样本1分离采用常 选择烤烟根病发生较少或投有发生的连作田，采集烟根o～15 基)控制细菌污染。在z5℃下培养1～3天，从每样品中挑取不同类型茵落，纯化待测。 1．3拮抗作用检测与精选 待浏分离物与供试病原物进行对峙培养检测拈抗作用I两菌相距3cm，同时接种于直径9cm 倒有PDA的平板培养皿中，一周后检查对峙培养结果I根据两苗落发展速度，菌落之间有无抑菌 带，菌藩前缘菌丝是否发生稀疏和萎缩畸变等现象，判别分离物的拮抗作用进行筛选，确定候选 菌株，并对候选菌种进行分类鉴定。 ·奉研究蓉云南省蝈草公司赉助项目． 529 1．4 测定拮抗蕾生防作用 1．4．1 烤烟种子发芽测定 把培养1周的待测拮抗茵和供试病原菌试管斜面，分别加蒸馏水 (10ral)，制成悬浮液，检查菌丝片断或孢子在lo‘个以上，剪取培养皿大小的吸水纸若干层；先 用4层吸水纸吸足病原菌悬浮液放入培养皿底，再用2层吸水纸吸足拮抗菌悬浮液覆盖其上，烤 烟种子浸泡24小时，充分清洗后均匀散播于吸水纸上，每皿50粒，设灭菌水对照，三次重复；每 天定时观察，视需要从培养皿边缘滴加灭菌水，记录发芽，生长及发病情况，统计生防效果。 1．4．2 t 盆栽试验细砂加玉米粉接501配方装瓶，加适量蒸馏水灭菌，培养病原菌(腐霉菌和 待测蕾在土表加一薄层，移栽十字期烟苗，设对照和3次重复}在室内阳台