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不同养殖区翡翠贻贝(Perna viridis)ATP酶的 初步研究 王淑红1’2洪华生1王新红1郑微云 1.厦门大学,厦门市 2.集美大学,厦门市 摘 要 本文以翡翠贻贝(Perna viridis)为研究对象,研究了ATP酶在翡翠贻贝不同组织的 分布以及个体大小对翡翠贻贝ATP酶活力的影响。并选择东山东沈、同安湾、杳林马銮 湾、火烧屿四个养殖区,进行了翡翠黯贝ATP酶活力的研究。结果表明:骑翠贻贝ATP 酶具有明显的组织特异性,以外套膜的活力最高.腮次之,消化腺最低。个体大小具有 显著差异的翡翠贻贝,外套膜和消化腺两种组织线粒体ATP酶活力无显著差异,鳃组织 的线拉体ATP酶活力有显著差异。4个站位经单因素方差分析,翡翠贻贝ATP酶活力无 显著差异。双样本方差分析,东山东沈与同安湾两个养殖区翡翠贻贝消化腺ATP酶活力 有显著差异。 关建词:翡翠贻贝,ATPase 随着沿海地区经济的飞速发展,大量工业废水和生活污水排放人海,仅厦门市1999 J。 严重影响了沿岸水产养殖业的健康持续发展。养殖环境的监测与保护已经刻不容缓。 然而,海洋是一个复杂多变的太生态系统,单纯监测几个理化指标或几种污染物的量. 难以反映海水环境的真实状况。生物学指标的变化是各种环境因子综合作用的结果, 这方面的研究越来越受到政府和科学工作者的重视。 贻贝是海水网箱养殖常见的附着生物,其固着和滤食的生活习性使之能有效的富 集周围海水中的污染物,已被公认为海洋污染监测的指示种“”。近几年来.国内外在 污染物对海洋动物ATP酶活力的影响方面,做了许多工作‘4J,如不同浓度硝基芳烃悼1溴 国内尚未见报道。本文进行了翡翠贻贝ATP酶基本生物学特性的初步研究:染亚致死效 【基金项目】教育部开放室重点项目 117 一 !!堂丝旦量璧墨星兰堕堡芏!工堂! 应的潜力,评价外源化合物的潜在危害。为监测早期污染,建立海水养殖水质监测标 准提供依据。 贰、实验材料与方法 一、试验材料 ATP酶组织特异性和个体大小对酶活力的影响所用翡翠贻贝采自集美海区。现场 解剖,分别取消化腺、鳃、外套膜于液氮中保存备用。 以东山东沈、杏林马銮湾、火烧屿、同安湾4个网箱养殖区为采样点,现场采集 翡翠贻贝,取消化腺、鳃于液氮中保存备用。 二、酶液的制备 样品称重后按1:4(w/V)女n人冷双蒸水,冰浴匀浆,高速冷冻离心机离心.2750rtmin、 0C离心20min,将线粒体沉 4℃离心10rain,以去除细胞碎屑。上清液在11500rpm、4 a蛆龃IV$)稀释例,于一800C的低温冰箱中保存备用。 淀按1:0.8(w 三、蛋白含量的测定 采用Bradford比色法测定‘…。 四、ATP酶活力测定 放量的多少表示ATP酶活力的强弱。本法采用L.Musbek测定磷的方法,井参照冯北 元等ll训的方法加以改进,磷标准曲线见图1。ATP酶在一定的反应条件下,与ATP作 用5min(25C水浴)后.加三氯乙酸并冰浴以终止反应,立即加入酸性钼酸钠和孔雀 绿溶液,2rain后加入7.8%的硫酸,反应1h后于625nm波长下测定无机磷。 酶活力计算:1Activity(unit)=Pi(umoles)t(mg.hour)。 0 0 O 目自”N口口。 |D 0 4 8
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