花椰菜的组织培养和试管繁殖.pdfVIP

维普资讯 沮卅农业科技 l999(I) 花椰菜的组织培养和试管繁殖 张小玲 张纯胄 唐征 徐婉莉 胡彩英 温州市农业科学研究所 花椰菜是重要的蔬菜作物，由于其雄性不育系难 以找到保持系 自交不亲和系 自身繁殖 较田难，影辑了优良杂交组合的研究和推广。本研究利用花椰菜的花球、花薹、无l茵苗项芽 为外植件进行组织培养，诱导出再生植株，并对再生植株进行了 譬繁殖，以辫为莉用组织 培养试管繁抽雄性不育系或自交不亲和系，进一步进行优e良杂变蛆舍的研究和虚帕蚀好l技术 准备 。 。 1材料和方法 11材料 ． 一 ． L r _ ’ I 供试花椰菜品种为 “温州特大瑞雪i00天”和 “东海明珠i00天” 1．2方活 ■一 一 一1| i … ， ． 1．2．1外植体的制备和接种。取未松散的花球和花茎。在超净工作台上，用75％酒精灭菌 30秒钟，再用饱和漂白精上清液藏菌15分钟，以无菌水冲洗3～4次，再用芜菌势带骧干后， 将外植体切成面积0．5 小．厚度0．1～o．2左右的小块，然后接种到准备好的培养基上， 每个5Oral的三角瓶接种三块 将种子灭菌后接种到I／2MS。(不含激素，基本培养基浓度减半)的培养基上}B～10天 后苗高达l~2cm时．切去根和下胚轴．将带叶的顶芽接种在培养基上，每瓶接种4个项芽。 1．2．2 继代培养 以不定芽、带 1叶的茎段或顶芽进行继代增殖，每瓶接种4～b个．25 天为一个继代周期。 ’ 1．2．3 生根培养。将继代培养过程中形成的顶芽或不定芽转接到相应的培并基生进行生 根培养．顶芽15天记载生根率 ，不 之芽25天记载成苗率。 1．2．4 试管苗的穆栽驯化和又田定植 将已生根的试管苗在室温条件下开瓶练苗3天 ， 取出生根苗．用清水洗净基部的培 养基，小心地种植在珍珠岩基质中，移栽后一周内放置在 室内光线明亮处，经常用细喷壶喷雾以保持叶面及周围湿润，一周店再移至全光温室培养， 3周后记载成活率 ．将其定植于塑料尢棚 内。 1．2．5 培养基和培养条件 本试验 以M S为基本培养基，根据不同培养 目的添加不同的 激素成分 (m g ／L)，蔗糖为3％．琼脂为0．6％，PH5．8，培养温度28±2’ ，白天由4。瓦 维普资讯 温州农业科技 1999(1) 日光灯补充光照124时o 2 结果与分祈 2．1不定芽的诱导 2．1．1由花茎切片诱导出不定芽 将灭菌后的花茎切片接种在含有不同浓度激素的培养 基上进行光培养 一个月届 ．在与培养基接触的切 口处分化出不定芽，经观察，这些不定芽 在花茎切片的切口处摊成一圈．可能是由韧皮部分化而来，在不接触培养基的切 口和周围舶 表皮上也发现l～蚧 较大的不定芽 不定芽的分化率以及每段切片分化不定芽的数量与培养