无胶筛分毛细管电泳分析几百个碱基对核酸的条件优化.pdfVIP

第 卷第 期 色 谱 年 月 无胶筛分毛细管电泳分析几百个碱基对核酸的条件优化Ξ 丁晓萍 廖 杰 刘晓达 王全立 马立人 国家生物医学分析中心基因分析实验室 北京 国家生物医学分析中心仪器中心 北京 提 要 通过正交设计实验综合分析了内充羟丙基甲基纤维素 无胶筛分毛细管电泳中的分离场强 浓度 柱长度和柱内径对核酸分离的影响 结果表明 柱长度越长 柱内径越小 分离场强越小 分离效果 ∀ 越好 考虑实际情况 为能在短时间内使几百个碱基对的核酸得到有效分离 一般选择 的涂 ∀ ≅ Λ 壁毛细管 柱内质量浓度为 的 场强为 的条件 并在此种条件下分析了 基因的 低浓度聚合酶链式反应 扩增产物 采用 扩增体系作为阴性对照的方法 对未经任何纯化处 ∀ 理的 扩增产物直接进样 可进行定性测定 ∀ 关键词 毛细管电泳 核酸 正交设计 分类号 试剂 前言 羟丙基甲基纤维素ε 时 的水溶液粘 度约为 公司 丙烯酰胺 对核酸的分析多采用毛细管凝胶电泳和无胶筛 公司Ν Νχ亚甲双丙烯酰胺 公 分毛细管电泳两种方法∀ 其中毛细管凝胶电泳分辨 率高 常用于 测序 但亦存在不足 目前 在 司过硫酸铵四甲基乙二胺 ∀