茶多酚中EGCG分离纯化工艺优化.pdfVIP

维普资讯 第 6卷 第 5期 中 国 食 品 学 报 Vo1．6 No．5 2006年 10月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology 0ct．2006 茶多酚中EGCG分离纯化工艺优化 杨性 民 刘青梅 高海月 应 敏 杨留明 (。浙江万里学院宁波市农产品加工技术重点实验室 宁波 315101 东华理工学院应用化学系 江西抚州 344000) 摘要 采用 (3)正交优化和层析分 离、纯化 EGCG，研 究不 同层析介质、洗脱剂和洗脱剂的酸度 、浓度及流速 对茶多酚中EGCG分离、纯化效果的影响。结果表明：影响EGCG分 离、纯化因素的主次顺序为：层析介质 洗 脱剂洗脱剂pH值 洗脱剂浓度 ；方差分析显示 ，4种 因素对 EGCG的分离、纯化影响均不显著 。应用单因素 试验检验正交实验，结果表明，采用聚酰胺作层析介质，洗脱剂为丙酮，洗脱剂pH3．5，洗脱剂流速 1．0mL／min 时效果最佳 。另外，在聚酰胺层析分离试验 中，EGCG流 出集中在 85—150min之间，100min时EGCG洗脱达最 大值，此时可获高纯度的EGCG单体。 关键词 茶 多酚 儿茶素 EGCG 分离纯化 文章编号 1009—7848(2006)05—0077—04 茶多酚的主要组分是儿茶素，它 由6种单体 1 材料与方法 组成 ，即L一表没食子儿茶素没食子酸酯 (L— 1．1 试剂与仪器 EGCG)、L一表没食子儿茶素 (L—EGC)、L一表儿茶 1．1．1 试验样品 茶多酚粗品，市购。L—EGCG、 素没食子酸酯 (L—ECG)、L一表儿茶素 (L—EC)、D． L—EGC、L—EC、D—C标样 。购 自中国药品质量鉴定 L一没食子儿茶素(D．L—GC)、D．L一儿茶素(D．L—G)。 所 。 表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)是茶多酚 中 1．1．2 层析介质 聚酰胺 (柱层析用)：100—200 儿茶素的主要单体 ，约 占儿茶素含量的50％一 目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂。 60％。有研究表明EGCG是一种重要 的生物活性 中性氧化铝 、硅胶 (层析用)：100—200 目，国 物质 ，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血脂、降血 药集团化学试剂有限公司。 压及抑菌等多方面的功效．其性能优于儿茶素的 1．1．3 试剂 甲醇、乙醇、丙酮均为分析纯，宁波 其它单体，可广泛应用于油脂、食品、医药、日化等 江东化学试剂公司。 领域 q，具有广阔的应用前景 。因此对高纯度 1．1-4 仪器 Agilentl100高效液相色谱仪，美国 EGCG单体的分离、纯化技术研究成为茶多酚开 安捷伦公司；色谱柱 。宁波市农产品加工重点实验 发的一个新热点 【。 室 自制 ：YZ9901恒流泵 。上海沪西分析仪器厂； 要得到高纯度 的单一儿茶素组分 EGCG。需 SB一5200超声波清洗机 。上海新芝生物技术研究 要在茶叶粗提物茶多酚基础上进一步分离纯化 。 所 。 由于吸附型填料价格便宜 ．具有吸附能力强、解吸 1．2 方法 容易、稳定性高、可再生、反复使用等优点，因此关 1．2．1 标准溶液配制 将 EGCG、EGC、EC、D—C 于柱层析法分离 、纯化儿茶素的报道不少I5--91。本文 等儿茶素单体用蒸馏水分别配制成 5．0、10．0、 在前人的研究基础上 ．应用吸附树脂柱色谱法对 20．0、40．0~g／mL的溶液 ，用孑L径 0．22 m的微孔 高纯度 EGCG分离、纯化工艺条件进行优化试验。 滤膜过滤后于