山药麸炒前后多糖成分对T细胞免疫功能影响.pdfVIP

山药麸炒前后多糖成分对T细胞免疫功能的影响★ 刘晓1,2,3，蔡皓1，2，一，傅紫琴1·2，一，王明艳5，蔡宝昌1，2，3，4” (1．南京中医药大学药学院，江苏南京210046；2．南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及 标准化工程研究中心，江苏南京210029；3．南京中医药大学国家中医药管理局中药炮制标准重点 学基础医学院，江苏南京210046) 摘要目的：研究山药麸炒前后多糖成分对免疫低下小鼠T细胞免疫功能的影响，以阐明 其炮制增效的町能机理。方法：腹腔注射环磷酰胺造免疫低下小鼠模型，MTT法测定脾脏T 淋巴细胞增殖，流式细胞技术检测外周血T细胞亚群水平。结果：山药麸炒前后粗多糖町显著 促进免疫低下小鼠的脾脏T淋巴细胞增殖，减少外周血T细胞中CD4+细胞数量、增加CD8+ 细胞数量，CD4+／CD8+明显低于模型组。总体试验显示麸炒品作用优于生品。结论：山药麸炒 前后多糖成分对免疫低下小鼠的T细胞免疫功能有明显促进作用，且麸炒后药效增强。 关键词 山药；多糖：炮制；T淋巴细胞：CD4+；CD8+ 山药为薯蓣科植物薯蓣DioscoreaThunb．的干燥根茎。生用功能偏补肾生精，益肺肾之 opposita 阴，临床常用于肾虚遗精、尿频、肺虚喘咳、阴虚消渴；麸炒则长于益脾和胃，益肾同精，为滋阴 或补阳的臣药，功偏补益，临床常用于脾虚食少、泄泻便溏【l引。历代医家记载及现代研究表明，山 药具有很强的补益作用，目前普遍认为多糖成分是其主要活性部位之一。故本文对山药麸炒前后多 糖成分对T细胞免疫功能的影响进行研究，为进一步探寻山药可能的炮制机理提供一定的实验依据。 l实验仪器与材料 1．1实验材料 1．1．1动物 KM种小鼠，18．22 g，雌雄各半，由南京中医药大学实验动物中心提供。 1．1．2试剂 香菇菌多糖(武汉迪奥药业有限公司，批号)；环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限 胰酶TrypsinGIBCO)溶血素(Fastlysing PharmingenTM)；其它试剂均为分析纯。 1．1．3试药 山药药材于2006年12月购于河南省外贸}不药有限公司，经南京中医药大学鉴定教研室鉴定， 为山药DioscoreaThunb．的干燥根茎。山药麸炒品为同一批药材按2005版中国药典[3】于本校 opposita 炮制教研室自制。取生品、制品各500g，加8倍量水冷浸12h，水煎煮1．5h，两次，合并水煎液， 加入2％新鲜配制的淀粉酶溶液于60℃保温5rnin除去淀粉(以滴加碘一碘化钾试液不变蓝为判断依 据)，抽滤，滤液浓缩至体积为500mL，以95％乙醇醇沉至含醇量为80％，静置过夜，抽滤，滤渣 依次经无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，50℃真空干燥即得粗多糖。经分析：生山药粗多糖总糖含量为 ’国家自然科学基金项 作者简介：刘晓，药学博士，助理研究员。研究方向：中药分析与药代动力学。电话：025Email： liuxia004_0@163．corn ¨通讯作者：蔡宝昌，教授，博士生导师。研究方向：中药炮制理论与炮制机理、中药饮片的规范化与标准化。电 ll 话：025-8581 12，Email：bccai@126，corn ．．490．． 量0．07％。 1．2实验仪器 C02 FACSDiva 细胞仪(美国BD公司)；BD Software分析软件；其它常规仪器。 2实验方法 2．1药物制备 2．1．1供试品的制备 取粗多糖，以蒸馏水溶解，分别配成低、中、高剂量(5 g药材／kg、10g药材／kg、20g药材／kg)， 高剂量组(B3)。 2．1．2香菇菌多糖药液的制备 取香菇菌多糖片充分研碎，蒸馏水超声溶解成混悬液，浓度为5mg／mL，作为阳性对照。 2．1．3环磷酰胺的制备 取环磷酰胺粉针剂，用生理盐水超声溶解并稀释，配成浓度为10