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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集 我国部分地区蛋鸡ALV—J流行毒株gp85 基因遗传进化分析 潘 伟,高玉龙,刘超男,孙芬芬,秦立廷,王永强,祁小乐,高宏雷,王笑梅’ (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨15000i) 摘 要:本研究对2009年从我国6个省区蛋鸡场分离到的19株舭J gp85基因进行了克隆,并与“株已 公布』uⅣ.J株gp85基因作了比较分析。结果表明,19个蛋鸡』uⅣ一J分离株的gp85基因长度为894bp~924bp 支;而3个分离株则不与任何参考毒株处在同一分支,提示它们发生了很大变异。本研究发现,许多变异ALV-J 毒株已出现在我国蛋鸡群中,其对蛋鸡致病力的影响则应引起兽医工作者的广泛重视。 关键词:蛋鸡;禽白血病病毒;J亚群禽白血病病毒;gp85基因;同源性;遗传进化 Jofavianleukosis J亚群禽白血病病毒(Subgroup 1材料和方法 viruses,ALV-J)最初由Payne…从肉用型鸡中分离得 到,该病毒的前病毒基因组具有典型c型反转录病 1.1 病毒株及序列本研究所用19株蛋鸡ALv.J 毒基因结构特点,即5’LTR、gag、pol、env、3’ 均为本实验室2009年~2010年间分离自我国部分 LTR。其中,不同毒株间gag和pol基因非常保守, 地区野毒株,它们的地理分布见表l。用于比对分 而el/V基因则发生了较大的变异[2-4]。env基因的变 析的其他序列来自GenBank,分别是国际参考株 异主要是由gp85基因变异造成的。gp85蛋白的变 异主要发生在第40~70、115~120、180~220等处 的氨基酸。有报道发现有些位点的改变可能导致疏 分离自海兰灰蛋鸡的参考毒株SD07LKl 水性显著变化,从而引起抗原性显著变化嘲。 09年年初以来,我国部分地区蛋鸡群中爆发了 ALV—jt们,给我国蛋鸡业造成了很大的经济损失。为 弄清这些地区蛋鸡ALV-J流行毒株的来源及进化关 (AY897224)、SD0101(AY897220)。 系,本研究对09年来从国内6个省区蛋鸡场中分离 1.2 主要试剂与仪器LA Taq聚合酶、dNTPs、 到的19株ALV.J的gp85基因进行了克隆测序,并 DLl0000DNA 与其它来源的11株ALV.J作了比较分析。 GelExtractionKit 司;Plasmid Kit和DNA Miniprep 为AxyGen产品,其它常规试剂均为国产分析纯。 益性行业(农qk)科研专项(200803020。XX03) 作者简介:潘伟(1984.),男,四川蓬安人,硕士研究生,主要从事分子病毒学研究. +通信作者:E-mail:xmw@hvri.ac.cn 一29— 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学
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