毛萼乙素抑制人正常和肝癌血管生成作用的实验研究.pdfVIP

毛萼乙素抑制人正常及肝癌血管生成作用 的实验研究 1，2 2 1 1 1 1 1 班立丽 ，黄健 ，张慧 ，罗敏 ，杨兵兵 ，韩宏升 ，李玛琳 ﹡（1．昆明 医学院天然药物药理重点实验室，昆明650031 ．2 ．昆明医学院第二附属医院药剂科，650101 ） 摘 要: 目的 二萜类化合物是一种十分重要的天然产物，广泛存 在于自然界，资源十分丰富，具有多种生物活性，作为潜在的抗肿瘤 活性物质来源具有较高的研究价值。本文研究的样品毛萼乙素是从滇 产毛萼香茶菜分离出来的一个二萜类化合物，在前期研究中证实对人 多种肿瘤细胞具有较强的增殖抑制活性。本研究进一步探讨它对人脐 静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响以及对人肝癌血管生成的影响，为 发现新的抗肿瘤药物提供线索。方法 人脐静脉内皮细胞的原代及传 代培养，免疫组化 FITC 法鉴定证实；采用改良 MTT 法，测试在 0.3-30ug/mL 六个浓度的毛萼乙素在体外对原代培养传至第三代的 HUVEC 增殖的影响和时效关系；建立人肝癌鸡胚尿囊膜血管生成模 型，探讨25ug/-100ug/egg 的毛萼乙素在器官水平对人肝癌细胞诱导 的血管生成的抑制作用。结果 毛萼乙素对HUVEC 的增殖具有明显 的抑制作用， IC50 值为7.27ug/mL；抑制效应呈剂量和时间依赖性 (r=-0.94,P0.05 ；r=-0.94,P0.0 １) 。在剂量为 25ug/egg 、 50ug/egg、100ug/egg 时对人肝癌鸡胚尿囊膜血管面积比的抑制率分 作者简介：班立丽，女，药理学硕士 ﹡通讯作者：李玛琳，女，教授，硕士生导师 Tel:(0871)5374638 E-mail:limalinb@ 别为14.15%、48.72% (P0.05)、60.63% (P0.05)，鸡胚尿囊膜上人 肝癌移植瘤诱导的血管生成受到了不同程度的抑制，抑制效应呈剂量 依赖性(r=-0.945,P0.0 １)，剂量在50ug/egg 时与阳性对照反应停 相当(P＞0.05) ，毛萼乙素的抑制强度大致处于中等水平。结论：毛 萼乙素对人脐静脉内皮细胞的增殖有明显的抑制作用，并能显著抑制 人肝癌细胞诱导的血管生成。 关键词：毛萼乙素 人脐静脉内皮细胞 血管生成 肝癌细胞 鸡胚 尿囊膜 中图分类号：R282.71 文献标识码:A 血管生成（angiogenesis）是指从已存在的血管上长出新血管的 过程。除了伤口愈合、女性妊娠和月经周期等生理过程外，在肿瘤、 糖尿病视网膜病变、关节炎和银屑病等病理情况下，也有活跃的新生 血管形成。研究表明，血管生成在肿瘤的转移、播散发展过程中发挥 着决定性的重要作用[1]。抗肿瘤血管生成治疗已成为近年来抗肿瘤研 究的新策略之一，也是未来最有希望的治疗肿瘤的方法之一。 与传统的抗肿瘤细胞毒药物相比，血管生成抑制剂针对肿瘤新生 血管生成过程，在肿瘤治疗中具有更多的优势如良好的特异性、不易 产生耐药及毒性较小等特点。近年来，以肿瘤血管为靶点研究和开发 的血管生成抑制剂不断涌现，国外已研究开发出了大约500 多个具有 [2] 抑制肿瘤新生血管生成活性的化合物，其中50多个如Endostatin 、 Angiostatin[3] 、thalidomide[4] 、SU6668[5] 、TNP～470[6] 等血管生 成抑制剂已经进入Ⅰ～Ⅲ期临床试验。 我国也从天然产物和合成化合物中筛选得到了一批具有血管生 成抑制活性的化合物如雷公藤红素[7] 。在众多的天然产物中，二萜 类（diterpenoids ）化合物是最有希望找到抗癌新药的化合物之一，大 部分在体外均有良好的抗肿瘤活性[8]。毛萼乙素就是从毛萼香茶菜属 分离鉴定出来且具有对映～贝壳杉型结构的一种二萜类化合物，研究 表明，该化合物在体外可抑制多种肿瘤细胞株的增殖 [9] 以及内皮细胞 株E