大腹园蛛主壶腹腺丝基因的筛选及序列分析.pdfVIP

第41卷 第 1期 东华大学学报 (自然科 学版) Vo1．41，NO．1 2015年 2月 JOuRNALOFDONGHUA UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE) Feb．2015 文章编号：1671—0444(2015)01—0053—07 大腹园蛛主壶腹腺丝基因的筛选及序列分析 张 雪，陈格飞，孟 清 (东华大学 生物科学与技术研究所 ，上海 201620) 摘要 ：为研 究蛛丝蛋 白编码基 因和蛋 白的组成结构模 式、进化 ，并为蛛丝仿生提供更 多的基 因资 源 ，运用 3D／PCR(three-dimensionalpolymerasechainreaction)技术对大腹 园蛛 (A．ventricosus) Fosmid基 因组文库进行主壶腹腺丝 (MaSp1)编码基 因的筛选，并对部分序列进行分析．通过 筛选 实验 室前期构建的Fosmid文库获得含有 MaSpl基 因的阳性克隆Av11—19—5，通过 shotgun测序 得到 MaSpl部分基 因序列 MaSplRC．MaSplRC长 786bp，编码 的262个氨基酸 (AvMaSplRC) 可划分为保 守的 C端非重复区(CT)和重复区(Rep)．Rep主要 由poly—Ala，Glyx和 GlyGlyx等模 块组成，AIa和Gly含量 占总氨基酸的 789／6；CT中参与形成离子键的氨基酸及 helix4上的疏水模 块高度保守．研究结果为蛛丝蛋 白二聚化及仿生学研究提供 了更多的基因资源． 关键词 ：大腹园蛛；主壶腹腺丝蛋 白；3D／PCR技术 ；序列分析 中图分类号 ：Q 78 文献标志码 ：A ScreenandSequenceAnalysisofMajorAmpullateSpidroin Gene．1frOm AraneusVentricosus ZHANGXue，CHEN Ge-fei，MENGQing (InstituteofBiologicalScienceandBiotechnology，DonghuaUniversity，Shanghai201620，China) Abstract：To research the spidersilk protein coding gene architecture，protein modules and supply differentkindsofgeneresourcesforbio-mimicingspidersilk。majorampullatespidroingene—l(MaSp1) geneisscreenedfrom anAraneusventricosus(A．yentricosus)Fosmidgenelibraryby3D／PCR (three— dimensionalpolymerasechainreaction)technologyandpartialMaSplsequenceisanalyzed．Byscreening theFosmidgenelibrary，a positiveclonecontainingtheMaSplgeneisobtained，termed Avl1—19—5， which isnow beingsequenced，andpartialMaSplcodinggene，M aSplRC，hasalready beenfoundout． MaSplRC is786 bp in size and encodes262 am ino acidswhich can be divided into non—repetitive C terminaldomain(CT)andrepetitivedomain(Rep)．TheRepismainlycomposedofpoly-Ala，Glyx and GlyGlyx modules，inwhichA laandGlycontentisabout78％ ．In CT domain，aminoa