基于VP22转导蛋白的人禽流感复制子疫苗构建和诱导细胞免疫应答研究.pdfVIP

112．肝衰竭患者血浆对体外培养永生化肝细胞的影响 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室(310003) 吕国良 张安业 陆颖峰虞晓鹏 朱春霞赵立夫潘小平 章益民 喻成波陈月美李兰娟 目的肝衰竭时大量毒性物质滞留于患者血液中，有可能影响生物人工肝系统中肝细胞的活性及 功能，并降低生物人工肝的疗效。本研究拟评价慢加急性肝衰竭病人血浆对体外培养的永生化人肝细胞 (HepLL)的影响。 方法8例慢加急性肝衰竭患者血浆置换过程中，弃去前100毫升置换后血浆，收集50毫升，混合后用 于肝细胞培养。相差显微镜及透射电镜观察细胞形态学变化，MTT方法检测肝细胞增殖能力，氨清除实验 评价肝细胞解毒功能。 结果暴露于100％肝衰竭血浆48d,时后，永生化人肝细胞能够保持增殖活性；但细胞形态较对照组细 长，胞浆中脂肪颗粒、溶酶体增多；细胞氨清除能力下降。 结论慢加急性肝衰竭病人血浆对体外培养的永生化人肝细胞有毒性影响，生物人工肝治疗过程中需 选择合适的治疗时间。 参考文献(略) 113．基于Ⅵ，22转导蛋白的人禽流感复制子疫苗构建 与诱导细胞免疫应答研究 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室(310013) 浙江省疾病预防控制中心(310051) 杨仕贵 沃健儿 李敏伟 喻成波 吕国良 曹红翠鲁海峰王保红 朱函平 李兰娟 已有多种方法用于禽流感疫苗的研究，然而关于禽流感疫苗的研究需面临疫苗免疫原性低下和病毒变异 问题。克服这种问题的一种可能的策略是将甲病毒复制子和转导蛋白Ⅵ，22(一种HSV-1蛋白)应用于禽流感 疫苗的研究，整合甲病毒复制子和转导蛋白Ⅵ，22功能优势。本研究通过生物信息学软件优化选择H5N1亚型 禽流感病毒安徽分离株作为疫苗候选株；构建携带候选株HA基因及VP22／HA融合基因的复制子疫苗(Ⅵ心一 为对照；最后，免疫BAI 毒人源分离株的HA基因同源性较高、亲缘关系较近，其表达的蛋白具有较多的抗原表位和较高的抗原性；构 建和包装的相关复制子颗粒均能表达相应蛋白、并可诱导细胞凋亡；复制子疫苗(V】冲-HA、V】姆-Ⅶ2扰忪) 抗原性和普遍代表性，构建的携带候选株}L～基因复制子疫苗可诱导细胞免疫应答。 ·345· 参考文献(略) 114．料染法实时荧光PCR结合熔解曲线分析技术监测人外周血克隆 j8I 特异性a T细胞及其在慢乙肝上的应用 浙江大学医学院附属第一医院传染科传染病诊治禽家重点实验室(310003) 杨介钻李兰娟 T淋巴细胞在机体免疫系统中占有极其重要的地位，T细胞不仅有效应功能，也是机体免疫调节功能的 重要因素之一。善缨脆膜表嚣特筐性分子…T缨脆受体口cell 相容性分子(MHC)复合体、参与免疫应答的重要分子，也是区分不同克隆性T细胞的藿要特征分子之一。正 常人外瘸盘95≯玎细腿豹鬣慕分子是由、 二条多肽链通过二硫键构成的异源性二聚体(其余静为￥、艿链构 籽灌因片段前端及V-D与D-J之间插入的核苷酸序列组成了TCR链CDR3。不同T细胞克隆凝有不同长度或 不同序列的TCR 能很好地反映不同疾病状态下T细胞的功能状态。 疾病的诊断与预后的判断，也可考虑分离特异性TCRBV基因转染外周血淋巴细胞来进行相应疾病(如肿瘤、 感染性疾病等)酶转基因治疗。我霞采用染料法实时荧光PCR技术对健康献瞧者或慢乙翳患者舞周斑24个 TCRBV家族基因进行分析，并对其PCR产物进行熔解曲线分析，建立基因熔解曲线谱型图，分析慢乙肝患 者终震血墨缨胞巍隆特努性扩增请漉。 1．材料与方法 l。l样本来源 正常对照组，健康献血者10例，男女各5例，年龄21-48 女性3侧，年龄25．50 学分会和感染病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》标准。所有患者除HBV感染外，其它已知病 原体抗体检测均阴性，无肿瘤和免疫性疾病，且在近6个月内来使用免疫调节剂或抗病毒治疗。 1．2主要试制