免疫试剂盒法与小鼠生物法用于检测雪卡毒素的比较.pdfVIP

第3l卷第1期 广东医学院学报 v01．31No．1 2013年2月 JOURNALOFGUANGDONGMEDICALCOLLEGEFeb．2013 85 免疫试剂盒法与小鼠生物法用于检测雪卡毒素的比较 杨 慧1，袁建辉2，梁海荣1，唐焕文1 (1．广东医学院公共卫生学院，广东东莞523808； 2．深圳市疾病预防控制中心，广东深圳518020) 摘要：目的比较免疫试剂盒法和小鼠生物法检测雪卡毒素(CTX)的优缺点，为雪卡毒素大规模筛选实验提供参 考。方法免疫试剂盒法和小鼠生物法检测同一批(40份)深海珊瑚鱼样品，并以高效液相色谱．质谱联用法(I-WLC． MS／MS)作对照，对检测结果进行比较分析。结果免疫试剂盒法检测雪卡毒素的阳性率和假阳性率分别为22．5％和 20．5％。均高于小鼠生物法02．5％和10．3％)。结论免疫试剂盒法与小鼠生物法相比，敏感性高，且有省时、操作简便 等优点，更适用于进行现场大规模快速筛选雪卡毒素实验。 关键词：雪卡毒素；免疫试剂盒法；小鼠生物法；检测方法 中图分类号：R155．5l 文献标识码：B 文章编号：1005-4057(2013)01．0085．03 DoI：10．3969巧．issn．1005-4057．2013．01．034 64 雪卡毒素(Ciguatoxin，CTX)是一种危害较大的公司；Allegra 赤潮藻毒素，不仅严重危害人体健康，还对一些依 赖渔业发展的国家带来很大的经济压力¨吐】。近10年 间，产自热带的雪卡毒素迅速蔓延至亚洲、欧洲以 Agilent 及美国的很多地方p】。我国南海和华南沿海地区属 3000串联三级四级杆质谱仪购自美国应用生物系统 于雪卡毒素的主要流行区域，尤其在香港和广东时 公司。 有中毒事件发生。目前雪卡毒素被确认的大部分组 1．2 方法 分都是通过高效液相色谱．质谱联用法(HPLC． 1．2．1样品提取和纯化采集深圳市南澳港口1．5～ MS／MS)鉴定的，它具有灵敏度高、特异性好、可准 2．0kg的深海珊瑚鱼样品40份，置一20。(2冰箱保存 确定量毒素含量等优点，一般将其作为雪卡毒素其 备用。样品提取时，将鱼肉和内脏在70℃水浴中温 他检测方法的重要辅助方案，提供准确的参考标 育15 min，待样品全部解冻后，用去离子水洗净， 准一J。但该法所需成本高，未能用于大规模的雪卡 匀浆机匀浆。称取100 g已匀浆的鱼肉样品，平均放 毒素检测。本研究采用免疫剂盒法和小鼠生物法检 置在4个洁净的250mL离心管中，加注25 mL氯仿和 测同一批珊瑚鱼样品，并通过HPLC．MS／MS对检测 50 mL甲醇，混匀lmin；再加入25mL氯仿，混匀 结果进行比较分析，旨为雪卡毒素大规模筛选实验 15 S；]E25 000 mL去离子水，混匀15S，2 r／min离心 提供参考。 10