阿魏酸钠体外诱导人骨髓基质细胞向神经细胞分化地研究.pdfVIP

天坛国际脑血管病会议 233 Tiantan International Stroke Conference 卒中的发生 能抑制C 蛋白系统功能的抗心脂抗体在炎症时也见增加 白细胞介素-1 和肿瘤坏死因子-a 能激活内 皮细胞 增加促凝血酶活性 新喋呤水平反映单核细胞的活性 它能产生相当大的促凝血酶活力 炎症时以上物质 均见增加 现有的研究结果证实 在动脉粥样硬化机制中 免疫机制是其始动因素之一 活化的T 细胞 外周血单 核细胞 巨噬细胞 血管内皮细胞和血管平滑肌细胞等产生白介素-6 白介素-6 诱导产生C 反应蛋白 纤维蛋白原 等 参与免疫炎症反应 导致动脉粥样硬化的发生 动脉粥样斑块的破裂甚至血栓形成 C 反应蛋白是炎症反应的 一个指标 C 反应蛋白水平与感染和非感染性炎症密切相关 据此反映患者体内的炎症程度 本研究发现 急性脑梗死患者血清C 反应蛋白的水平显著高于健康体格检查者 P0.01 表明C 反应蛋白水 平的增高与急性脑梗死的发生有关 本组研究为免疫炎症参与脑梗死的发生提供了直接的证据 提示C 反应蛋白是 脑梗死的一种危险因素 也可作为监测脑梗死病情的临床生化指标 参考文献 略 阿魏酸钠体外诱导人骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究 邓志锋 汪泱 赖贤良 涂伟 江西医学院第二附属医院神经外科 南昌 330006 摘要 目的 探讨阿魏酸钠 Sodium ferulate, SF 体外诱导人骨髓基质细胞 human marrow stromal cells, hMSCs 向神经细胞分化的作用 方法 采用密度梯度离心及贴壁法分离纯化hMSCs 用阿魏酸钠对其进行诱导培 养 采用MTT 法观察SF 对hMSCs 生长的影响;倒置显微镜下观察诱导后细胞的形态变化; 免疫细胞化学方法检测 诱导后神经细胞特异标志物的表达 结果 在含0.5-1mg/ml SF 的培养基中 7 d 后hMSCs 的存活率为95%左右 hMSCs 经阿魏酸钠诱导培养后 转变为典型的神经样细胞 并检测到巢蛋白 nestin 神经元特异性烯醇化酶 NSE 和胶质纤维酸性蛋白 GFAP 的表达 计数结果显示 经阿魏酸钠诱导3h 后 约30%的hMSCs 表达nestin, 而24 h 后未检测到nestin 阳性细胞 诱导6 h 后可见NSE 和GFAP 阳性细胞 3 d 后NSE 和GFAP 表达率达最高 分别 为67% 和39% 左右 结论 一定浓度的阿魏酸钠对体外培养的hMSCs 的生长无明显影响 经 SF 诱导培养后 hMSCs 可向神经前体细胞分化进而向成熟神经细胞分化 骨髓基质细胞 marrow stromal cells, MSCs 是骨髓中一群能自我更新及具有多分化潜能的非造血系干细胞 大量研究证实MSCs 可分化为中胚层细胞 如成骨细胞 软骨细胞 脂肪细胞及肌细胞等 最近有报道证实MSCs 不仅限于分化为中胚层细胞 在体内外MSCs 已被成功地诱导分化为神经细胞 外胚层来源 如Kopen 等发现当 把MSCs 移植到新生小鼠的侧脑室后 它们可以分化成星型胶质细胞和能表达神经丝蛋白的细胞 最近也有研究证 实MSCs 在一定体外培养条件下可被诱导分化成神经样细胞 如在含 -巯基乙醇或 3-异丁基-1- 甲基黄嘌呤 IBMX 的无血清培养基中 MSCs 可以被诱导分化成神经细胞 MSCs 经BDNF 和 NGF 的作用或MSCs 与鼠中脑细胞悬液共同培养 也可分化成神经细胞 这些发现为进一步研究MSCs 向神经细胞 分化的潜能起了很大的促进作用 但所报道的诱导剂适合临床应用的很少 阿魏酸是传统活血化淤中药当归 川穹等的主要成分 有文献报道阿魏酸钠具有清除自由基 抗脂质氧化和抗 血小板聚集等作用 其已在临床用于血栓性疾病的治疗 我们前期研究证实阿魏酸钠具有防止脑缺血后神经元凋亡 的作用 本实验将报道阿魏酸钠能成功诱导hMSCs 分化为神经细胞 方 法 材料 DMEM培养基 B27 bFGF购自Gibco公司