DNA和抗癌药物6-巯基鸟嘌呤相互作用的电化学研究及分析应用.pdfVIP

DNA与抗癌药物6．巯基鸟嘌呤相互作用的电化学研究及分析应用 蛰IL蕴，王薇，陈婷，张修华，蔡火操，王升富+ (湖北大学化学与材料科学学院，湖北武汉430062) 法研究了DNA与非电活性掮癌药物6_巯基鸟嘌呤(6-1G)之间的相互作用。运用循环伏安和交流 阳抗力矬I剐1亥修饰电极进行了电化学表征。微分脐冲溶出伏安法(DPSV)实验表明，K3Fe(CN)6 分子探针在DNA修饰电极上的还原峰电流随舛G浓度的增大而增大，表明6-TG与DNA之 间存茧Rj互作用，我cf]初步推测，6-TG结合到DNA双链大沟或磷酸骨架上，目劓、了Fe(CN留一与 电流与6-TG的浓度之问的线性关系，该电极可用于非电括性抗癌药物6-TG的定量测定。 1实验部分 1．I仪器与试剂 工作电极，饱和甘汞电极(SCE)为参比电极。铂丝为对电极；320一S酸度／离子计 公司，美国)：小牛胸腺DNA(Sigma公司，美国)：其它试剂均为分析纯，实验用水为 石英二次蒸馏水。 1．2 DNA／Au膜电极的带0备 Au盘电极经依次用0．5岬、0．05lJ：m的y-A1203抛光粉抛光至呈镜面，用二次水冲洗， 乙醇、二次水充分超声洗净。将其取出，放入1．0mol／LH2s04溶液中在0～1．5V电位 范围内进行CV扫描直到稳定。取30山O．5蚓山DNA滴涂在处理好的Au盘电极表面， 室温干燥10h，然后置于二次水中浸泡4h以除去未吸附的DNA，即制得DNA／Au。 2结果与讨论 2．1DNA／Au膜电极的电化学表征 mol／L 在1．0×10。4 K3Fe《CN)6的溶液中，裸金电极于0～0．6V之间CV扫描，在 流显著降低，基本观测不到氧化还原峰。交流阻抗谱显示，DNA／Au膜电极在高频部分 可以观察到由于异相电子传递电阻产生的半圆。这表明DNA覆盖了相当部分的电极表 明显的阻碍作用，探针分子难以通过膜层孔隙到达电极表面。上述实验表明DNA已被修 饰到金电极表面，且膜比较致密。 2．2实验条件的优化 采用灵敏度较高的DPSV方法进行实验。DNA／Au膜电极在1．0X10～mol／L6．TG的磷 author． +Conesponding E-mail address：wangsf@hubu．edu．cn 255 针分子的峰电流最大，故选择0．5V和120s为最佳沉积电位和最佳沉积时间进行实验。 2．3DNA与∞略之间的相互作用及其分祈斑用 图1是在最佳沉积电位和沉积时间的条件下得到的DPSV曲线。从图1可以看出， 随着6-TG浓度的坳m K3Fe(Cr06分子探针的还原峰电流线性增加。参照相关妇斟”J，魏们 初步推测，K3Fc(CN)6分子探针的还原峰电流随6-TG浓度的增加而线性增加的可能匾因是 光谱和荧光光谱实验进一步证实了两者之间存在相互作用。另外，该修饰电极也可用于 6-TG的定量测定，线性范围为2．0x10r8～8．0x10-7，检测下限为6．0xlff9m01．L1。对 6-TG 3．0xlo_’m01．L19次测定，其相对标准偏差为1．68％。 图1Differential of1．0x104mol01 inthemixtureof pulsestrippingvoltammograms K3Fe(CNh and 0PBSoil Theconcentration from L．1 pH6 DNA／Au．(pe of is 2．0xlff8tool 6-thioguanine 6-thioguanine to t001．L．1、． 8．0x10-7 参考文献： 1．DW D．Abnarm,Anal Pang，H Chem．．19970：3162 2．D．W D．iZhan，P．E al。J．Electroanal．Chem．，2004，567：339 Pang，Yf