禽用疫苗病毒液澄清处理方法研究.pdfVIP

禽用疫苗病毒液澄清处理方法的研究 姜北宇，刘月焕，景小冬，黄凤军，校海霞 (北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100089) 澄清处理试验研究。结果证明，以高效滤布过滤，其澄清的效果好、速度快，不丢失病毒，是一种较好的大批量疫苗抗原液浓缩 前澄清的方法。将病毒液通过离心，可获得较清亮的病毒液，其澄清效果最好，病毒有效成份亦无丢失，也是大批量病毒液浓 缩前澄清的可选择方法之一。通过试验研究确定了各种不同病毒液浓缩前的澄清处理工艺流程。 [关键词]疫苗I病毒液f澄清处理 在用鸡胚、鸭胚及细胞繁殖生产出的各种病毒 毒价为107。11EID5。／o．1ml。 液中，除了含有大量病毒颗粒以外，还存在许多细胞 1．1．5EDS76VHSH23株本组于1991年自河北 组织碎片及代谢产物等杂质，使得病毒液呈现混浊 某EDS76流行地区病鸡中分离，经过系统的鉴定， 或半混浊状态，如果直接用这种病毒液进行浓缩操 证明为纯净的EDS76病毒株，其毒价为106一EID。。／ 作，将会很快使超滤膜阻塞，而无法完成病毒液的浓 0．1ml，HA效价≥1：10240。 · 缩，并致使超滤膜报废。因此，病毒液在浓缩之前，首 1．2过滤材料。 先必须进行澄清处理，去除病毒液中的大颗粒杂质， 1．2．1医用纱布北京嘉事堂药业公司购入。 使其成为半透明或透明溶液，用这样的病毒液进行 1．2．2绢布北京元隆稠布店购人。 浓缩，才可能使浓缩过程正常进行，确保超滤膜的使 1．2．3高效滤布4号、5号，均由北京某公司购入。 用寿命。病毒液浓缩前的澄清处理是浓缩过程中一 1．2．4尼龙过滤布由北京某布店购入。 个关键的技术环节，我们尝试使用了许多方法，对病 1．2．5滤毡北京希达过滤技术开发公司赠与。 毒液进行澄清处理，包括用离心机离心、纱布过滤、 1．2．6无纺布由天津麻纺厂及北京华表过滤材料 绢布过滤、无纺布过滤、石棉过滤、高效滤布过滤、微 厂赠与。 孔过滤等。通过试验确定了病毒浓缩前澄清处理工 1．2．7微孔滤膜1．2u及2．0u混合纤维素微孔滤 艺，现将结果报告如下： 膜，1．2u聚丙烯微孔滤膜，均由北京化大黎明膜材 料厂购人。 1材料与方法 1．2．8 M一50型玻璃滤器由上海玻璃仪器四厂购 1．1病毒株 入。 1．1．1鸡新城疫病毒(NDV)LaSota株由中国兽药1．3真空泵天津市医疗器械二厂。 监察所引入，本组用SPF鸡胚扩繁；HA价为1： 1．4离心机Beckman公司生产。 1280，毒价为109‘oEID。。／o．1ml，用于生产疫苗抗原 1．5试验方法采用不同膜材料过滤或离心的方法， 液的毒种。 对病毒液进行澄清处理，观察不同方法的澄清效果 1．1．2禽流感(AIV)WD株由本组采自河北省某肉 及效率，并对处理前后的病毒液取样，测定病毒效 种鸡场，经中国预防医学科学院国家禽流感中心鉴 价，以此证明病毒液在澄清处理过程中是否有丢毒 定为H9N2亚型，HA为1：640。毒价为108。5EID50／现象，比较各种方法的澄清效果。 0．1ml，用于生产制苗抗原液的毒种。 1．1．3鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)RJQ902株本 2结果 6。5 组分离鉴定并培育出的