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家兔染色体Giemsa带型研究初报.pdf
遗传 HEREDITAS(Beijing) 2。): 34-361980 家兔染色体Giemsa带型研究初报 陈勇夫王建国游文凤耿廷德罗慧敏邓之真 河(南医学院生物教研室,郑州) 家兔 O(ryctolaguscuniculus)是一种常用 2,将已制成的标本片置70-75℃烤箱中, 实验动物,被广泛应用于医学和遗传学研究.周 干烤2小时。 宪庭曾对家兔染色体组型作了研究r.13[,并测定 3.在38℃下将标本放人胰酶溶液中消化 了各对染色体定量特征。但由于某些染色体相 30-40秒后立即将标本放人1:10Giemsa盐溶 对长度、形态特征不明显如(A组4-10号等), 液中 p(H6.8),染色30分钟。 仅用一般方法很难彼此区分,这就迫切需要应 照相与分析 用染色体显带技术对家兔正常带型进行研究。 在油镜下选择染色体分散良好,带型清晰 基于这种设想,我们对家兔进行了_Giemsa显带。 的细胞进行照相。 本文共分析了20个细胞。参照周宪庭对 材料 和方法 家兔染色体组型的研究w[,并根据Clausen的分 标本制备 类标准151,将44条染色体分为四组。依据照片 1.培养基成份 Nissui199培养液 (日水 和镜下观察,对带型特征进行分析。 制药株式会社)80务、小牛血清20呢。分装于 5毫升培养瓶中,每瓶加入PHA 广(州市医药 结 果 工业研究所产,批12mg,青链 正常家兔体细胞染色体由22对组成,即 霉素各500单位。调pH至7.2,, 2.从兔心脏取血二毫升,每瓶加人免 全血0.2-0.3毫升。在380C培养箱内培 养68-72小时,终止培养前4-6小时 加人秋水仙碱,使培养基内的最终浓度为 0.5-0.8微克/毫升。 3.用0.075M氯化钾在38℃下低渗 18-22分钟,使细胞胀大。 4.在甲醇一冰醋酸(3:1)混合固定液中 固定30分钟,并反复更换2-3次、充分洗 除杂质。 5.以冷滴片法制作标本,经火焰或热 吹风使标本干燥。 显带方法2.〔41 图I 正常家兔(e)应用Giemsa显带技术的染色体组型模式图 1.称取胰酶0.25克,加生理盐水 100 ChenYongfuetal.:PreliminaryReportonGiemsa 毫升,临用时配制。 BandingPatterninOryetolagrnscunicusrts . 34 21对常染色体和 1对性染色体。按照着丝点位 宽的浅带。 置将常染色体分为4组:即中着丝点的为A组; 第12对染色体:短臂近心段有一条深带,长臂有 近中着丝点为B组;近端着丝点为C组;端着 两条深带,均靠近近心段。远心段可见特宽的浅带。着 丝点为无色区。 丝点为D组。每组染色体按大小顺序排列编号 第 13对染色体:短臂有两条深带,两条深带之间 (图版 1,1)0 有宽的浅带。长臂有三条深带,近心段的两条狭而靠 现将家兔染色体 Giemsa带型特征一一进 近,远心段的一条较宽。 行描述,并根据带型特征绘制出模式图 (图1, 第 14对染
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