水通道蛋白-8对结肠癌细胞株HT-29多药耐药因子的影响.pdfVIP

·263· 生垡塞坠处型苤盍2Q!垒生!旦筮!!鲞箜!塑垡坠!』垦!P§!氇：坠!坐型!!!垒：y!!：!!：盟!：呈 ·大肠外科· 水通道蛋白一8对结肠癌细胞株HT一29多药 耐药因子的影响 杜海潮 刘杰石晓明 吴胜春姜广伟 吕柏楠 【摘要】 目的通过转染过表达水通道蛋白一8(AQP一8)的真核表达载体，观察AQP·8对结肠 癌HT-29细胞株多药耐药因子表达的影响。方法取对数生长期的人结肠癌HT-29细胞株用于实 blot检测 验。构建绿色荧光蛋白(GFP)．AQP一8真核表达载体并转染至HT-29细胞，通过Western GFP—AQP．8转染效率；采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率；通过实时荧光定量聚合酶链反 应(FQ—PcR)和Westernblot检测转染GFP-AQP一8的HT-29细胞多药耐药因子P-糖蛋白(P-gP)、谷胱 甘肽s转移酶一1T(GST-盯)及拓扑异构酶Ⅱ(TopolI)的mRNA和蛋白相对表达量。结果Westernblot结 mRNA相对表达水平(0．976±0．086)与对照质 果显示，GFP．AQP-8转染后结肠癌HT-29细胞AQP-8 粒GFP．N1转染组(0．140±0．024)比较显著上调(P0．05)。MTr分析结果显示，转染了GFP．AQP．8 的结肠癌HT-29细胞增殖抑制率[(22．86±3．75)％]与GFP．N1组[(1．12-i-0．17)％]比较显著升高 (P0．05)；与转染GFP—NI的对照组[(4．95±0．58)％]比较，转染了GFP—AQP-8的HT-29的细胞凋 亡率显著增加[(14．08±2．37)％，P0．05]。FQ—PCR和Westernblot结果显示，GFP．AQP-8组P．即、 4-0．12、1．024-0．12、0．96 照组各基因mRNA表达水平(分别为0．99 4-0．14)均明显降低(P0．05)， GFP—AQP-8组P—gP和GST-耵蛋白表达水平(分别为0．28±0．04、0．37±0．05)与转染GFP-N1对照组 表达水平(分别为0．834-0．08、0．75±0．10)比较明显下降(P0．05)，TopolI的蛋白表达在GFP-AQP一8 组(0．60±0．08)与GFP—N1组(0．62 4-0．07)比较变化不明显(P0．05)。结论过表达AQP-8可 II的表达有关。 抑制HT-29细胞生长，该抑制作用可能与抑制耐药基因P—gP、GST．订、Tope 【关键词】水通道蛋白-8；结肠肿瘤；多药耐药性 Effects of of onthe of resistancefhctorsofhuman overexpressionaquaporin-8expressionmultidrug coloncancerHT-29cells Du Haichao，Liu Jie，鼽iXiaoming，WuShengchun，JiangGuangwei，Lyu Bonan．Departmentof Xian Emergency，People’sHospitalof Coumy，XianCoumy蚴2卯，China o眦7mr：Shi CorrespondingXiaoming．Email：shixiaomin91999@126．con To theeffectsof the