小干扰RNA沉默多药耐药相关蛋白基因2对人肝癌细胞HepG2多药耐药的逆转作用.pdfVIP

生堡塞笙丛型苤蠢翌!!生!旦篁!竺鲞箜!塑鱼垫』坠￡塾鹜：皇!g!壁鲨!!!!丛!!：!!：! ·1547· ·实验研究· 小干扰RNA沉默多药耐药相关蛋白基因2 对人肝癌细胞HepG2多药耐药的逆转作用 褚忠华 张大伟 刘建平 韦金星 苏正 陕基德 【摘要】 目的检Nd,十扰RNA(siRNA)对肝癌耐药细胞侏HepG2／g可霉素(ADM)多药耐药 相关蛋白基困2(MRP2)及其蛋白产物的抑制作用，观察对多药耐药性的影响。方法使用浓度梯 度法制作HepG2耐ADM细胞株(HepG2／ADM)，ADM浓度从0．1～2．0ms／I．；设计合成针埘MRP2的 tl后通过实时荧光定量逆转录一聚合酶涟反应 siRNA小片段，转染HepG2／ADM耐药缅胞，24 blot检测siRNA对MRP2基因mRNA和蛋白的抑制效果；噻唑蓝(MTF)比色 (RT—qPCR)和Western 法观察抑制MRP2基因表达后，HepG2／ADM细胞对化疗药物的敏感性变化，并计算各药物的半数 抑制浓度(IG。卜结果HepG2／ADM对ADM、5-氟尿嚎啶(5一Fu)、长春新碱和奥沙利钠的Ic。值分 白的表达(P0．05)；转染MRP2一siRNA后，HepG2／ADM细胞对ADM、5-Fu、长春新碱和奥沙利铂的 Ic。值明显减小，分别为0．】023、t，4417、0．0452和0．0268。结论用siRNA沉默MRP2基冈能够逆 转HepG2／ADM细胞对化疗药物的耐药性，MRP2基因与HepG2／ADM肝癌细胞的多药耐药性相关， 可通过沉默MRP2基1月提高耐药细胞对化疗药物的敏感性。 【关键词】 癌，肝细胞： 多药耐药性； 多药耐药相关蛋白基因2；小十扰RNA 2 in resistance·associated siRNA resistance reversed by multidrug gene Silencingmultidrug proteins carcinomacells CHU Da—wei，LlU Jilt— hepatocellular HepG2 Jian—ping，WEl Zhong—hira，zHANG Yat—St?It Zheng，SHAN Surgeo‘，SunMemorial xing。SU Jt—de．DepartmentofHepatobiliary Hospital，Sun Yat—Sen 510120．Ciita Universit)7．GuangzhOlt author：UU CorrespondingJian—ping，Emaif：liuzhunlong@126．corn To of 2 【Abstract】objective the