结核融合蛋白AMM亚单位疫苗强化BCG初始免疫的免疫效应研究论文.pdfVIP

散和形成有效的肉芽肿，说明几．12可能是Thl应答增强剂，在控制结核感染中具有不可替代的地 位。我们的研究显示肺结核患者治疗前IL—12明显低于对照组和治疗后IL．12水平，抗结核治疗后 杀灭病菌，血清IL．12水平升高。 生，其作用是通过单核细胞中相应因子的转录来实现的。文献报道，在大鼠急性肺损伤(ALI)模型 的表达也逐渐减少，意味着机体保护作用减弱。我们的研究显示，肺结核患者治疗后血清IL—13 明显高于治疗前和对照组。推测，机体抗炎作用的增强，有助于机体产生保护作用，或是强化的 Thl应答受到同样强化的Th2应答负调节。其后果是：一方面宿主抗结核的免疫反应可能被削弱； 另一方面也避免了由于过度强烈的Thl反应可能对宿主整体造成的病理免疫损害。IL．13对单核细 胞抗炎作用和通过B淋巴细胞对人免疫应答刺激效果，说明它可与IL一4和IL．10共同引起Th2型应答 效应；而从IL．13协同合成的影响看，它又可能是启动Thl型免疫反应，说明IL—13是一种具有高度 多效性的细胞因子。肺结核患者血清IL．12、IL一13水平测定可能对我们了解患者机体免疫状态， 对临床上抗结核治疗的评估，了解结核病的病情及预后提供新线索。 结核融合蛋白AbIM亚单位疫苗强化 BCG初始免疫的免疫效应研究 兰州大学医学校区病原生物学研究所730000 姜雯雯于红娟景涛易 娟李青雒或宋楠楠张颖祝秉东 结核病自上个世纪80年代以来感染率逐渐增高，如今，每年全世界结核新发病例就有880多 万人，死亡人数达200万之多。减毒牛型结核分枝杆菌株(BCG)是目前世界上许多国家批准应用 于人体的惟一抗结核疫苗，它对婴幼儿结核病有较好的预防保护作用，尤其针对儿童严重的播散 性肺结核有预防作用，但其保护作用效果在不同地区进行的临床调查中差异很大，在080％之 间，尤其对发展中国家的成人几乎无保护作用。为了在全球有效控制结核病，我们迫切需要研制 新的结核疫苗，采取新的疫苗免疫策略。 新型结核疫苗的主要研究方向包括：研制免疫效应强于BCG的疫苗替代BCG和研制结核亚单 位疫苗强化BCG的免疫效应。由于BCG对婴幼儿的保护肯定，寻找合适的亚单位疫苗在适当时期 进行加强免疫似乎是一种更可行的方案，也是目前国际上新型结核疫苗及其免疫策略研究的一种 思路。 不同的初免-力口强免疫策略实验在动物模型和人体上正在进行。MVA85A是目前进展最快的结 核疫苗，已经即将完成1I期临床试验，开始III期临床试验。Ansar 位疫苗加强免疫BCG免疫过的人群，证明这一免疫策略可以诱导CD4+T细胞分泌干扰素一Y，发挥 较强的免疫原性，并且无全身毒副作用。他们的研究还表明，BCG初始免疫和MVA亚单位疫苗加 323 强免疫问隔时间对免疫效应没有明显的影响，并且MVA85A疫苗只要加强免疫一次就可以取得理 想的效果。 蛋白亚单位疫苗和以病毒为载体的疫苗免疫效果有一定的差异，蛋白疫苗往往需要多次加强 剂辅助下都可以诱导与BCG近似的免疫保护效果。这些蛋白亚单位疫苗有希望用于加强BCG疫苗 的初始免疫。但尚没有研究分析蛋白亚单位疫苗加强免疫次数对免疫效应的影响，也没有研究对 蛋白亚单位疫苗强化免疫激活T细胞的类型进行分析，而这些对于制定强化免疫策略和方案是很 位疫苗具有较强的免疫原性。本研究中，我们用BCG初始免疫小鼠，8周后用融合蛋白AMM和佐 剂DDA，BCG--PSN构建的亚单位疫苗分别加强免疫一次或两次，检测免疫反应强度与特性，探 索亚单位疫苗加强BCG疫苗免疫策略的免疫程序，为结核疫苗免疫策略奠定基础。 1．材料和方法： 1．1，材料： His· BL21。以上三种蛋白原核表达载体由复旦大学遗传学研究所构建，本实验室保存。Ni—NTA Bind Chemicals biosciences)。 Resins购自Novagen(EMDInc)公司。ELISPOT试剂盒(U．CyTech RPMll640(Gibco Biosciences 购自BD(BD